PrimeSTAR® HS DNA Polymerase
cDNAを鋳型としてのPCR
ヒト心臓total RNAのM-MLV RTaseによる逆転写産物を鋳型として、PCRを行った。
PrimeSTAR HS DNA Polymeraseは、他社High-Fidelity PCR酵素に比べて逆転写後のcDNAを鋳型とした場合にも効率よく増幅できた(下図)。
図 PrimeSTAR HS DNA Polymeraseと他社High-Fidelity
PCR酵素の増幅効率の比較(逆転写産物を鋳型として使用)
サンプル:ヒト心臓total RNAの逆転写産物
ターゲットの長さ:2 kbp
鋳型量:さまざまな濃度のtotal RNAから逆転写を行った反応液20 μlのうち、5 μlを鋳型として使用
サーマルサイクラー:TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice(製品コード TP650)
PCR条件: | 98℃ | 10秒 |
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55℃ | 15秒 |
30サイクル |
72℃ | 2分 |
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* 他社High-Fidelity PCR酵素の反応条件は推奨プロトコールに従った。
レーンM:λ-
Hind III digest
1:total RNA 50 pg相当
2:total RNA 500 pg相当
3:total RNA 5 ng相当
4:total RNA 50 ng相当
5:total RNA 100 ng相当
6:total RNA 250 ng相当
PrimeSTAR® HS DNA Polymerase