PCR

(2)非特異的増幅産物の低減効果例(プライマー1対を使用)

Multiplex PCR Assay Kit(製品コード RR060A/B)

反応特異性が非常に低いプライマー(増幅サイズ 250 bp)を用いて、3 step、および2 stepの条件で増幅を行った。
50 μlの反応系に鋳型として50 ngのヒトゲノムDNAを添加し、プライマーは最終濃度0.1 μMで使用した。

<サイクル条件>
3 step PCRでの反応2 step PCRでの反応
94℃, 30 sec.94℃, 30 sec.
94℃, 30 sec.
 
94℃, 30 sec.
 
35 cycles
55℃, 10 sec.35 cycles65℃, 60 sec.
72℃, 60 sec.
72℃, 5 min.
72℃, 5 min.

<結果>