PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
増幅鎖長の確認(1ステップRT-PCR)
【方法】 |
ヒト心臓由来total RNA またはHL60 細胞由来のtotal RNAを鋳型として(100 ng/50 μl反応系)、ターゲット遺伝子の様々な長さの領域を1ステップRT-PCRで増幅した。 |
反応条件: |
50 ℃ |
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30 min. |
94 ℃ |
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2 min. |
↓ |
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98 ℃ |
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10 sec. |
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55 ℃ |
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5 or 15 sec. |
30 cycles |
72 ℃ |
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1 min./kb |
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【結果】0.5 - 6 kbで、増幅が確認できた。
1:GAPDH |
428 bp |
2:Dystrophin |
1 kb* |
3:Dystrophin |
2 kb* |
4:Dystrophin |
4 kb* |
5:Dystrophin |
6 kb* |
6:CCND2 |
2.1 kb |
7:CCND2 |
2.8 kb |
8:TFR |
500 bp |
9:TFR |
3 kb |
10:TFR |
4 kb |
11:TFR |
4.4 kb |
M1:100 bp DNA Ladder |
M2:pHY Marker |
M3:λ-Hind III digest |
* ヒト心臓由来のtotal RNAを鋳型として使用。
他のターゲットはHL60由来total RNAを使用。 |
PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit