PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit

増幅鎖長の確認(1ステップRT-PCR)

【方法】 ヒト心臓由来total RNA またはHL60 細胞由来のtotal RNAを鋳型として(100 ng/50 μl反応系)、ターゲット遺伝子の様々な長さの領域を1ステップRT-PCRで増幅した。

反応条件: 50 ℃   30 min.
94 ℃   2 min.
 
98 ℃   10 sec.
 
 
55 ℃   5 or 15 sec. 30 cycles
72 ℃   1 min./kb  

【結果】0.5 - 6 kbで、増幅が確認できた。


1:GAPDH 428 bp
2:Dystrophin 1 kb*
3:Dystrophin 2 kb*
4:Dystrophin 4 kb*
5:Dystrophin 6 kb*
6:CCND2 2.1 kb
7:CCND2 2.8 kb
8:TFR 500 bp
9:TFR 3 kb
10:TFR 4 kb
11:TFR 4.4 kb
M1:100 bp DNA Ladder
M2:pHY Marker
M3:λ-Hind III digest
* ヒト心臓由来のtotal RNAを鋳型として使用。
他のターゲットはHL60由来total RNAを使用。

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