PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit

増幅鎖長の確認(2ステップRT-PCR)

ヒト心臓由来total RNA を鋳型として、Dystrophin遺伝子の様々な長さの領域を2ステップRT-PCRで増幅した。
【方法】 total RNA 800 ng/20 μl反応系で逆転写反応(Oligo dT Primerを使用)を行い、そのうち5 μlを鋳型として50 μl反応系(total RNA 200 ng相当 / 50 μl PCR反応系)で下記条件のPCRを行った。

PCR条件: 98 ℃   10 sec.
 
 
55 ℃   15 sec. 30 cycles
72 ℃   1 min./kb  

【結果】~ 6 kbで良好な伸長と増幅が確認できた。
M:λ-Hind III digest

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