核酸電気泳動
試薬
NuSieve GTG Agarose
トリス酢酸緩衝液（pH8.0）〔TAEと略記〕
染色液 500 μg/L エチジウムブロマイド
トリス酢酸緩衝液（pH8.0）〔TAEと略記〕
| 40 mM | Tris-HCl |
| 20 mM | 酢酸ナトリウム |
| 2 mM | EDTA |
器具
| ヒートスターラー台、スターラーバー（大型） | 1組 | |
| 先を太くしたパスツールピペット | 1本 | |
| 65℃に保温可能な温浴槽 | 1槽 | |
| 電気泳動装置EP500TまたはEP600T | 一式 | |
| UVイルミネーター | ||
操作手順
- アガロースの溶解
1）アガロース6 gを150 mlのTAEに少量ずつ加え撹拌する。
2）完全に分散し、塊が認められなくなったことを確かめてから加熱スイッチを入れ、60～70℃に保ち、スターラーで撹拌する（完全に溶けない場合は、グラスウールで塊を除去して使用する）。
3）溶かしたアガロースは、60～65℃の温浴で保温しておく。 - ゲルの作製
1）ゲルトレーを泳動槽にセットし、トレーの両側にゲルトレー用間仕切り板を差し込む（アガロースが漏れないようにきっちりと差し込むこと）。
2）サンプルコーム等のセットが全て完了してからゲルを流し込む。
3）固化後、TAEをゲル上3 mmまで入れ、コームを注意して抜く（TAEで満たす前にコームを抜くと、ウェルが乾燥してしまうので注意）。 - 試料およびマーカーのアプライと泳動
1）ウェルに、サンプル、マーカー（BPB）を分注。
2）70 V、約3時間で泳動が完了する（5 V/cmゲル）。 - 染色
染色液に30分間浸漬する。 - 脱色
蒸留水に15分間静置浸漬する。これを2回繰り返す。
結果
UVイルミネーターにより、染色バンドを観察する。
図2 核酸アガロース電気泳動
図2 核酸アガロース電気泳動
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4 μg DNA
Lane 1：φX174-Hae III
2：pBR322-Alu I
3：pUC19-Alu I
4：pUC19-Hae III
2 μg DNALane 5：φX174-Hae III
6：pBR322-Alu I
7：pUC19-Alu I
8：pUC19-Hae III |
