ApoPrimer Set (Bcl-2 family)

Standard protocol

TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver 3.0を使用した場合

[RT-PCR反応液組成]
RT mix
25 mM MgCl2 2 μl
10 ×RNA PCR Buffer1 μl
10 mM dNTP mix1 μl
RNase Inhibitor(40 U/μl)0.25 μl
AMV RTase(5 U/μl)0.5 μl
Random 9 mer(50 pmol/μl)0.5 μl
Positive Control RNA or Sample RNA0.5 μl
H2O4.25 μl
total10 μl

PCR mix
RT反応液10 μl
5×PCR Buffer10 μl
TaKaRa Ex Taq HS(5 U/μl)0.25 μl
各 primer mix(each 10 pmol/μl)*1 μl
H2O28.75 μl
total50 μl
* Primer dimer を形成する可能性があるので、94℃,2 min 加熱処理、 急冷した後、使用すること。

[反応条件]
RT30℃10min1 cycle
42℃15min
99℃2min
5℃5min
PCR94℃30sec35 cycles
60℃30sec
72℃30sec

  ApoPrimer Set (Bcl-2 family)