PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit

増幅鎖長の確認(1ステップRT-PCR)
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit(製品コード R023A)

【方法】

ヒト心臓由来total RNAまたはHL60細胞由来のtotal RNAを鋳型として(100 ng/50 μl反応系)、ターゲット遺伝子の様々な長さの領域を1ステップRT-PCRで増幅した。
反応条件:45℃  30 min. 
94℃2 min.
↓ 
98℃  10 sec.
 
30 cycles
60 or 55℃15 sec.
68℃1 min./kb

【結果】

0.5~6 kbで、増幅が確認できた。
 鋳型量(50 μl PCR 反応系)
1:TFR0.5 kb
2:Dystrophin1 kb*
3:Dystrophin2 kb*
4:CCND22.8 kb
5:TFR4.4 kb
6:Dystrophin6 kb*
M1:pHY Marker
M2:λ-Hind III digest
*:ヒト心臓由来のtotal RNAを鋳型として使用。他のターゲットはHL60由来のtotal RNAを使用

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