PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
検出感度の測定(1ステップRT-PCR)
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit(製品コード R023A)
【方法】
さまざまな量のHL60細胞由来total RNAを鋳型として用い、GAPDH遺伝子の428 bpをターゲットとした1ステップRt-PCRで、検出感度を測定した。
| 反応条件:45℃ | | 30 min. | |
| 94℃ | 2 min. |
| ↓ | |
| 98℃ | | 10 sec. | | 30または40 cycles |
| 55℃ | 15 sec. |
| 68℃ | 30 sec. |
【結果】
total RNA量10 pg(30 cycles)または1 pg(40 cycles)から検出が可能であった。
| 鋳型量(50 μl PCR 反応系) |
| 1 | : | 1 pg | 6 | : | 100 ng |
| 2 | : | 10 pg | 7 | : | 1 μg |
| 3 | : | 100 pg | 8 | : | 2 μg |
| 4 | : | 1 ng | 9 | : | 4 μg |
| 5 | : | 10 ng | M | : | pHY Marker |
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit