簡易プロトコール（オプション）
（製品コード 9180）
簡易プロトコールは、標準プロトコールよりさらに操作を簡略化し、多検体処理などに適しています。ただし、PCR反応液に持ち込めるDNA抽出液の量は、標準プロトコールとは異なりますのでご注意ください。
- 使用前にReagent AならびにReagent Bを静かに転倒混和し、1試料あたりReagent Aを20 μl、Reagent Bを4 μl、滅菌精製水を40 μl混合し、試薬Mix を調製する。*1 （Reagent A：Reagent B：滅菌精製水＝ 5：1：10）
- 試料1～10 mg*2を0.2 mlマイクロチューブに採取する。
- 1. で調製した試薬Mix 64 μlを添加し、試料を浸す。*3
- 50℃で3分、続けて95℃で3分間のインキュベートを行う。*4
- 上清（DNA抽出液）*5をPCR*6のテンプレートとして使用する。（通常のPCRの場合、PCR反応液に対する抽出液の添加量は、1/25量までとしてください。添加量が多すぎると、PCR阻害がかかる場合がありますのでご注意ください。*7）
- 不溶物（組織）がチューブ内に残っている場合、上清を別のチューブに移して保存する。*8
＊1 処理する試料の体積は、最大で抽出液の1/2（試料と試薬Mix が目視で等量）以下を目安とし、採取量に応じて試薬Mixの量を増減してください。 この場合、試薬Mixの混合比率を変更しないようにご注意ください。
＊2 試料により最適処理量が異なります。Q＆AのQ2をご参照ください。
＊3 試料は、試薬Mixに浸るようにチップの先などでチューブの底に入れてください。
＊4 インキュベーション後、チューブのふたに抽出液が付着している場合は、卓上遠心機などを利用して軽く遠心したのちに、チューブのふたを開けるようにしてください。
＊5 抽出液に不溶物（組織）が混在している場合は、軽く遠心分離を行ったのち上清をご使用ください。
＊6 PCRに使用する酵素は、Tks Gflex DNA Polymerase（製品コード R060A/B）、MightyAmp DNA Polymerase Ver.2（製品コード R071A/B）、TaKaRa Ex Taq Hot Start Version（製品コード RR006A/B）、またはPrimeSTAR GXL DNA Polymerase（製品コード R050A/B）をご使用ください。rTaqでは増幅効率が悪い場合があります。
＊7 試薬Mixに対して試料が過剰であれば、得られた抽出液によりPCR反応が阻害されることがあります。この場合、抽出液を滅菌精製水で希釈したものを用いることで、PCR反応が改善される可能性があります。あらかじめ、使用するPCR条件で、最適のDNA抽出液の量を予備検討していただくことをお勧めします。
＊8 DNA抽出液は使用まで4℃で保存し、早めにご使用ください。直ちに使用されない場合は、－20℃で保存してください。
Reagent A ：Reagent B ：滅菌精製水を5：1：10 の割合で混和する。（試薬Mix）
↓
1～10 mgの組織を0.2 mlマイクロチューブに入れる。
↓
試薬Mixを64 μl加える。
↓
50℃ 3分、95℃ 3分インキュベート
↓
DNA抽出液（上清）を、PCR反応に用いる。
↓
（PCRの反応液量に対し1/25量まで持ち込み可）
↓
1～10 mgの組織を0.2 mlマイクロチューブに入れる。
↓
試薬Mixを64 μl加える。
↓
50℃ 3分、95℃ 3分インキュベート
↓
DNA抽出液（上清）を、PCR反応に用いる。
↓
（PCRの反応液量に対し1/25量まで持ち込み可）
