PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit

増幅鎖長の確認(製品コード R026A/B)

【方法】

ヒト心臓およびマウス心臓由来のtotal RNA、またはHL60細胞由来のtotal RNAを鋳型として(1 μg/50 μl反応系)、ターゲット遺伝子の様々な長さの領域を1ステップRT-PCRで増幅した。

反応条件45℃10 min.(但し12 kbは15 min.)
94℃2 min.
98℃10 sec.
 
30 cycles
55℃15 sec.(但し8, 12 kbは60℃)
68℃10 sec./kb


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Target Size (Template)
1TFR0.5 kb(HL60由来total RNA)
2Dystrophin1 kb(ヒト心臓由来total RNA)
3Dystrophin2 kb(ヒト心臓由来total RNA)
4TFR4.4 kb(HL60由来total RNA)
5Dystrophin6 kb(マウス心臓由来total RNA)
6Dystrophin8 kb(マウス心臓由来total RNA)
7Dystrophin12 kb(マウス心臓由来total RNA)
M1100 bp DNA Ladder
M2λ-Hind III digest

【結果】

0.5~12 kbで、増幅が確認できました。

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