PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit

検出感度の測定(製品コード R026A/B)

【方法】

さまざまな量のHL60細胞由来total RNAを鋳型として用い、GAPDH遺伝子の428 bpをターゲットとした1ステップRT-PCRで、検出感度を測定した。

反応条件:45℃10 min.
94℃2 min.
↓
98℃10 sec.
 
30または40 cycles
55℃15 sec.
68℃10 sec.




Template量(HL60由来total RNA)
1:10 fg7:10 ngM:100 bp DNA Ladder
2:100 fg8:100 ng
3:1 pg9:1 μg
4:10 pg10:2 μg
5:100 pg11:4 μg
6:1 ng

【結果】

total RNA量10 pg(30 cycles)または100 fg(40 cycles)から検出が可能でした。
また、total RNA 4 μgを用いた場合にも良好な反応が見られ、鋳型量の許容範囲の広さも確認できました。

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