PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
検出感度の測定(製品コード R026A/B)
【方法】
さまざまな量のHL60細胞由来total RNAを鋳型として用い、
GAPDH遺伝子の428 bpをターゲットとした1ステップRT-PCRで、検出感度を測定した。
反応条件 | : | 45℃ | | 10 min. | |
| | 94℃ | | 2 min. | |
| | | ↓ | |
| | 98℃ | | 10 sec. |
|
30または40 cycles |
| | 55℃ | | 15 sec. |
| | 68℃ | | 10 sec. |
Template量(HL60由来total RNA)
1 | : | 10 fg | 7 | : | 10 ng | M:100 bp DNA Ladder |
2 | : | 100 fg | 8 | : | 100 ng | |
3 | : | 1 pg | 9 | : | 1 μg | |
4 | : | 10 pg | 10 | : | 2 μg | |
5 | : | 100 pg | 11 | : | 4 μg | |
6 | : | 1 ng | |
【結果】
total RNA量10 pg(30 cycles)または100 fg(40 cycles)から検出が可能でした。
また、total RNA 4 μgを用いた場合にも良好な反応が見られ、鋳型量の許容範囲の広さも確認できました。
PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit