Smart Cycler® II System を用いた場合の反応例
One Step TB Green™ High Speed RT-PCR Kit (Hyper-PCR™)（製品コード RR076A）
- 下記に示す反応液を氷上で調製する。
＜1反応あたり＞ 試薬 使用量 5×One Step High Speed Buffer 5 μl dNTP Mixture (10 mM each) 0.5 μl Ywhaz-F primer (20 μM) *1 0.5 μl Ywhaz-R primer (20 μM) *1 0.5 μl PrimeScript II RT Enzyme Mix 0.5 μl High Speed PCR Enzyme 1.5 μl TB Green希釈液（用時調製） *2 1 μl template*3 2 μl RNase Free dH2O 13.5 μl total 25 μl *1 当社の【Perfect Real Timeサポートシステム】のPrimerを使用。
*2 TB Green Solution（×250）をRNase Free dH2Oで10倍希釈。
*3 Mouse heart total RNA（1 pg/μl、10 pg/μl、100 pg/μl、1 ng/μl、10 ng/μl）を使用。
- 反応を開始する。
反応チューブをSmart Cycler用遠心機で軽く遠心後、Smart Cyclerにセットし、反応を開始する。
Stage 1：逆転写反応 45℃、1分 95℃、1分 Stage 2：PCR反応 98℃、 1秒 40 cycles 55℃、 1秒 68℃、 6秒 Stage 3：Melt Curve 
