AAVpro^® Extraction Solution

目的遺伝子を搭載しないAAV2ベクターを産生するHEK293細胞からAAVpro Extraction Solution（製品コード 6235）を用いてAAV2ベクターを抽出した。なお、AAV2ベクターの調製にはAAVpro Helper Free System (AAV2)（製品コード 6230）を用いた。比較対照として、凍結融解法によりAAV2ベクターを抽出した。得られたウイルス液はそれぞれリアルタイムPCRによるベクターゲノム定量を行った後、1×10⁹ vg分のウイルス液をSDS-PAGEに供して、ウイルス液中に混入している不純タンパク質を評価した（図1）。さらにインターカレーター法により、ウイルス液中に混入している2本鎖DNAの定量を行った（図2）。その結果、AAVpro Extraction Solutionを使用して得られたウイルス液は、凍結融解法と比較して明らかに不純タンパク質と2本鎖DNAの混入が少ないことが示された。

AES：AAVpro Extraction Solution F/T：凍結融解法 (1×109 vg / lane)

図1．AAVpro Extraction Solutionを用いて抽出したAAV2ベクター溶液のSDS-PAGE


図2．AAVpro Extraction Solutionを用いて抽出したAAV2ベクター溶液中の2本鎖DNA混入量