サンプル: | ミニブタ(オス9日齢)関節、パラフィン包埋切片 |
賦活化処理: | マイクロウェーブ処理 |
一次抗体: | Anti-Osteonectin/SPARC, Monoclonal (Clone ON1-1)(製品コード M125) 1,000倍希釈(2 μg/ml) |
二次抗体: | TaKaRa POD Conjugate Anti Mouse, For Tissue(製品コード MK204) |
基質: | TaKaRa DAB Substrate(製品コード MK210) |
操作手順: |
1)脱パラフィン 2)内因性ペルオキシダーゼのブロッキング 3% H2O2、室温15分 3)賦活化処理(マイクロウェーブ処理) MW (500W)、5分×3回 4)非特異性のブロッキング 10% Goat Serum in PBS、室温10分 5)一次抗体反応、4℃, overnight 6)TaKaRa POD Conjugate、室温30分 7)DAB発色 8)核染色(ヘマトキシリン) 9)脱水・透徹・封入 |