試薬の準備 |
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Buffer B5*1が添付の英文説明書に従って調製、希釈されていることを確認する。
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1. サンプルの準備 |
| 400 μlまでのDNA溶液に対してTE Bufferを加えて800 μlにする。
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2. Bufferの添加 |
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800 μlの希釈DNA溶液にBuffer NT 200 μlを添加して、強く撹拌して混合する。 |
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3. カラムへの吸着 |
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NucleoSpin gDNA Clean-up XS Column(緑色のリング)を2 mlのCollection tubeにセット。
2の溶液500 μlをカラムに添加し、11,000×g、30秒間遠心する。
ろ液を捨て、カラムを同じチューブに再セットする。
残りの2の溶液をカラムに添加し、11,000×g、30秒間遠心する。
ろ液を捨て、カラムを新たな2 mlチューブにセットする。
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4. メンブレンの洗浄 |
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NucleoSpin gDNA Clean-up XS Columnを2 mlチューブの中で180℃回転させ、遠心の際、逆側にGがかかるように調整する。
Buffer B5 100 μlをカラムに添加し、11,000×g、2分間遠心する。
ろ液を捨て、カラムを1.5 mlチューブ(各自で用意)にセットする。
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5. DNAの溶出 |
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Buffer BE 6~10 μlをカラムに加え、11,000×gで1分間遠心する。
さらにBuffer BE 6~10 μlをカラムに加え、11,000×gで1分間遠心する。
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6. エタノールの蒸発 |
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1.5 mlチューブの蓋をあけて90℃で5~8分間保温する(10 μlの場合5分間、10 μlで2度溶出した場合8分間)。
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