Tks Gflex™ DNA Polymerase Low DNA

【反応液組成】

	使用量	最終濃度
Tks Gflex DNA Polymerase Low DNA (2×)	10 μl	1×＊1
Template	＜200 ng
Primer 1	4～6 pmol	0.2～0.3 μM＊2
Primer 2	4～6 pmol	0.2～0.3 μM＊2
dH2O for Low DNA	up to 20 μl

＊1Mg⁺² 1 mM、dNTP 各200 μM
＊210 kb以上の長鎖を増幅する場合、最終濃度0.2 μMで反応を行う。
　　縮重プライマーを使用する場合は、最終濃度0.6 μM以上で反応を行う。

【PCR条件】

94℃	1 min.	＊1
↓
98℃	10 sec.
55～60℃＊2	15 sec.		30～35 cycles＊3
68℃	60 sec./kb

＊1：	増幅領域がGC richの場合や長鎖ターゲットの増幅を行う場合には、94℃ 1分で初期変性を行うことを推奨する。
＊2	極めて特異性の高いバッファー系を採用しているため、アニーリング温度を60℃より高く設定すると反応不良となる可能性がある。標準的な反応条件で特異的な増幅が可能。
＊3	少量のテンプレートを用いて反応する場合はサイクル数を増やす。