サンプル: | マウス全身(day3)、ホルマリン固定パラフィン包埋切片 |
賦活化処理: | マイクロウェーブ処理 |
一次抗体: | Anti-Mouse E-cadherin, Monoclonal (Clone ECCD-2)(製品コード M108) 1,000倍希釈(2 μg/ml) |
二次抗体: | Anti Rat IgG-Alexa488 |
操作手順: |
1)脱パラフィン 2)内因性ペルオキシダーゼのブロッキング 3% H2O2、室温15分 3)賦活化処理(マイクロウェーブ処理) MW (500W)、5分×3回 4)非特異性のブロッキング 10% Goat Serum、室温10分 5)一次抗体反応、4℃、 overnight 6)二次抗体反応、室温30分 7)核染色(Hoechst 33342) 8)脱水・透徹・封入 |