牛乳中のサルモネラ菌DNAの抽出
MightyPrep reagent for DNA（製品コード 9182）
PCRでの検出
牛乳にサルモネラ菌を添加した懸濁液10μl より本製品およびA社試薬を用いてDNA抽出液を調製し、以下のPCR酵素でサルモネラ菌DNAのPCR検出を行った。
牛乳にサルモネラ菌を添加した懸濁液10μl より本製品およびA社試薬を用いてDNA抽出液を調製し、以下のPCR酵素でサルモネラ菌DNAのPCR検出を行った。
・MightyAmp DNA Polymerase Ver.3（製品コード R076A/B）
・Tks Gflex DNA Polymerase（製品コード R060A/B）
・Tks Gflex DNA Polymerase（製品コード R060A/B）
 |
M 100 bp ladder 1 MightyPrep reagent for DNA 2 A社試薬 |
| MightyAmp DNA Polymerase Ver.3 | Tks Gflex DNA Polymerase | |||||||||||||||
| DNA抽出液使用量 | 2.5 μl | 2.5 μl | ||||||||||||||
| Total volume | 25 μl | 25 μl | ||||||||||||||
| ターゲット | invA（605 bp） | invA（605 bp） | ||||||||||||||
| PCR条件 |
|
|
||||||||||||||
qPCRでの検出
Salmonella enterica var. Enteritidisの菌体懸濁液を牛乳で希釈した試料より、本製品及びA社試薬を用いてDNA抽出液を調製し、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (製品コード RR420)を用いて、サルモネラ菌のDNAを検出した。
A社試薬を用いた場合より、MightyPrep reagent for DNAを使用した場合、Ct値が低くなり良好な検出ができた。
反応条件
Salmonella enterica var. Enteritidisの菌体懸濁液を牛乳で希釈した試料より、本製品及びA社試薬を用いてDNA抽出液を調製し、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (製品コード RR420)を用いて、サルモネラ菌のDNAを検出した。
A社試薬を用いた場合より、MightyPrep reagent for DNAを使用した場合、Ct値が低くなり良好な検出ができた。
反応条件
| DNA抽出液使用量 | 2.5 μl | |||||
| Total volume | 25 μl | |||||
| ターゲット | invA | |||||
| PCR条件 |
|
MightyPrep |  |
A社試薬 | |
Ct値 |
||
| Sample | MightyPrep reagent for DNA |
A社試薬 |
| 原液 | 14.41 |
30.31 |
| 1/10希釈液 | 17.76 |
38.91 |
| 1/100希釈液 | 21.11 |
37.58 |
| 1/1000希釈液 | 25.39 |
- |
| 1/10000希釈液 | 29.20 |
- |
