【方法】
- Day0
RHB-A培地で長期培養したHuman Neural Cortex Cell Lineをアストロサイト分化培地に懸濁し、poly-L-ornithine(Sigma-Aldrich社)およびLamininでコートしたプレートに2.5×104 cells/cm2となるように播種した。
- Day1~22
アストロサイト分化培地で培養を継続し、2日に1回培地交換を行った。
※培地の組成
<アストロサイト分化培地>
Basal培地: RHB-A(製品コード Y40001)
添加剤:10 ng/ml BMP-4, Human, Recombinant, Carrier-free(R&D Systems, Inc., cat. 314-BP-010)
図1.分化誘導22日目の蛍光顕微鏡写真
GFAP(緑)とMAP2(赤)の蛍光二重免疫染色にて、GFAP陽性細胞(アストロサイト)への分化が確認できた。