核酸抽出

	試薬の調製	Buffer VW2＊1が添付の英文説明書に従って調製、希釈されていることを確認する。 また、Carrier RNA＊2がRNase free水で溶解され、stock溶液が調製されていることを確認する。
1.	サンプルの溶解	Collection Tube（1.5 ml：蓋付）にProteinase K 5 μlを分注する。200 μlのサンプルをこのチューブに添加し、ピペッティングで混合する。 200 μlのBuffer VLを加え、vortexで10～15秒緩やかに混合する。 5.6 μlのCarrier RNA Stock溶液を加え、緩やかに混合する。室温で3分間放置する。 （必要なら、各ステップで軽く遠心して、蓋についた液を落とす。）
2.	エタノールの添加	1. の溶液に200 μlのエタノール（96～100％）を添加し、vortexで10～15秒混合する。 室温で5分間放置する。 軽く遠心して、蓋についた液を落とす。強く遠心して沈殿が生じないように注意する。
3.	カラムへの吸着	NucleoSpin Virus ColumnをCollection Tube（2 ml：蓋なし）にセットする。 2. の溶液610 μlをカラムに加え、4,000×g、3分間遠心する。＊3 ろ液を捨てた後、新しい2 mlのCollection Tubeにカラムをセットする。
4.	メンブレンの洗浄	1回目の洗浄 Buffer VW1 400 μlをカラムに添加し、11,000×gで30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、新しい2 mlのCollection Tubeにカラムをセットする。 2回目の洗浄 Buffer VW2 400 μlをカラムに添加し、11,000×gで30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、新しい2 mlのCollection Tubeにカラムをセットする。 3回目の洗浄 Buffer VW2 200 μlをカラムに添加し、最高速（最大20,000×g）で5分間遠心する。 ろ液を捨てた後、新しい1.5 mlのCollection Tubeにカラムをセットし、蓋を開けて56℃で5分間乾燥させる。
5.	DNAの溶出	70℃で予温したRNase free水 30 μlを添加し、室温で3分間インキュベートする。 20,000×gで3分間遠心し、核酸を溶出させる。

*1	Buffer VW2の調製法 製品コード 740983.10（10回用）の場合：Wash Buffer VW2 (Concentrate) 6 mlに96～100％エタノール 24 mlを添加する。
*2	Carrier RNA Stock溶液の調製法 製品コード 740983.10（10回用）の場合：300 μgの凍結乾燥品のCarrier RNAにRNase free水 300 μlを加えて溶解させる。溶解後は－20℃で保存する。
*3	この遠心操作ですべての溶液がカラムを通過しなかった場合は、高速遠心（15,000～20,800×g）を1分間行う。これでも溶液がカラム上部に残っている場合には、新しい試料でやり直す方が望ましい。

＜注意＞
使用時には、詳細は必ず添付の英文説明書を確認すること。

*1、*2は、製品コード 740983.10（10回用）の場合の調製法である。
製品コード 740983.50（50回用）、740983.250（250回用）の場合の調製法は英文説明書を参照すること。