ゲノム編集

PPIB（Cyclophilin B）に対する2つのgRNA（Dharmacon）を作成し、Cas9タンパク質（他社またはGuide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)）との複合体（RNP）をiPS細胞（KOLF-2, Wellcome Trust Sanger Institute）へTransIT-X2 Dynamic Delivery System（1 μl/well添加、24-well plate, Mirus Bio）を用いて導入した。Cas9は6 nMとし、gRNAは各種濃度を検討した。導入48時間後にT7E1ミスマッチアッセイを用いて切断効率を算出した。