DEF-CS培養システムとCRISPR/Cas9 GesicleによるhiPSCのCD81ノックアウト
ヒトiPS細胞（DEF-CS培養）
培養液に添加
6、12時間培養
培地交換 7日間培養
ゲノム編集iPSCプール
Cas9／sgRNA Gesicle
Cas9／sgRNA（RNP）
細胞接着性タンパク質
蛍光タンパク質
- 細胞膜に親和性を持つエキソソーム様小胞”Gesicle”にCas9／sgRNA複合体を封入
- 培養液に添加するだけの簡便プロトコールでCas9／sgRNA複合体を導入
- 表面蛍光タンパク質（赤色）により、導入効率のモニタリング可能
Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System（製品コード 632613）を用いて調製したCRISPR/Cas9 Gesicleを、DEF-CS培養システムを用いて培養中のhiPSCに直接添加した後、6、24時間培養後に培地交換を行い、さらに7日間培養を継続後、CD81の発現状態をFACS解析により解析した（左図フロー）。その結果、6時間または24時間CRISPR/Cas9 Gesicleと接触した細胞でそれぞれ43％、49％のCD81KO細胞が確認された（右図）。
