ユーザー様実施例2：HDAC6のクローニング
データご提供：筑波大学 医学医療系 皮膚科 信田 理沙様
PCRやクローニングでお困りの方は、ぜひ一度お試しください！
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■ 実験の概要
局在マーカーのコントロールとしてHDAC6のクローニングを行った。これまで様々なPCR酵素を使用したが条件を変えてもうまくいかなかったため、試供品で頂いたTaKaRa Ex Premier DNA polymeraseを使用した。■ 結果
レーン情報：
M1：λ Hind III digest
1：B社PCR酵素（cDNA：HEK293）
2：B社PCR酵素（cDNA：HeLa）
3：TaKaRa Ex Premier（cDNA：HEK293）
4：TaKaRa Ex Premier（cDNA：HeLa）
M2：100 bp ラダーマーカー
サンプル：HEK293 cDNA、 HeLa cDNA
ターゲット名:HDAC6
増幅サイズ：3,648 bp
M1：λ Hind III digest
1：B社PCR酵素（cDNA：HEK293）
2：B社PCR酵素（cDNA：HeLa）
3：TaKaRa Ex Premier（cDNA：HEK293）
4：TaKaRa Ex Premier（cDNA：HeLa）
M2：100 bp ラダーマーカー
サンプル：HEK293 cDNA、 HeLa cDNA
ターゲット名:HDAC6
増幅サイズ：3,648 bp
PCR条件：
B社PCR酵素
TaKaRa Ex Premier
| 98℃ 98℃ 55℃ 72℃ 72℃ 4℃ | 30 sec. 10 sec. 15 sec. 2 min. 10 min.∞ | 35 cycles |
TaKaRa Ex Premier
| 94℃ 98℃ 55℃ 68℃ 72℃ 4℃ | 1 min. 10 sec.15 sec. 2 min. 7 min. ∞ | 35 cycles |
■ 製品に関するコメント
他の酵素で何度か条件をふっても増幅できなかったサンプルが一度で増幅できたので、大変助かりました。PCRやクローニングでお困りの方は、ぜひ一度お試しください！
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