核酸精製キットとの抽出性能比較
＜対象製品＞
Directタイプ：One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-treatment)（製品コード RC805S/A）
室温処理タイプ：One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-heat-treatment) （製品コード RC801S/A）
熱処理タイプ：One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Heat-treatment) （製品コード RC803S/A）
鼻腔ぬぐい液中のRSウイルスの抽出性能
鼻腔ぬぐい液にHuman respiratory syncytial virusをスパイクした検体を用いて、2種類の核酸精製キットによる処理またはEasy Directシリーズによる各種前処理＊1を行い、各RT-qPCR試薬での反応に供した＊2。
その結果、Easy Directシリーズでは核酸精製キットと同程度のCt値＊3が得られた。
Easy Directシリーズによる核酸の抽出性能は、核酸精製キットと同等であると考えられる。
＊1 Directタイプは、前処理なしで反応へ供した。
＊2 精製核酸には、室温処理タイプ／熱処理タイプと同一のRT-qPCR試薬を用いた。
＊3 RT-qPCR反応への検体持込量が理論上1.0 μl相当となるようにCt値を補正した。
なお、実際の検体持込量、実測Ct値、補正後Ct値は以下の通りである。
＜試験条件＞
検出系：Respiratory Syncytial virus Primer/Probe Mix（製品コード RC501A）
リアルタイムPCR装置：Thermal Cycler Dice Real Time System IV（製品コード TP1000）
リアルタイムPCR条件：
Directタイプ：One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-treatment)（製品コード RC805S/A）
室温処理タイプ：One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-heat-treatment) （製品コード RC801S/A）
熱処理タイプ：One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Heat-treatment) （製品コード RC803S/A）
鼻腔ぬぐい液中のRSウイルスの抽出性能
鼻腔ぬぐい液にHuman respiratory syncytial virusをスパイクした検体を用いて、2種類の核酸精製キットによる処理またはEasy Directシリーズによる各種前処理＊1を行い、各RT-qPCR試薬での反応に供した＊2。
その結果、Easy Directシリーズでは核酸精製キットと同程度のCt値＊3が得られた。
Easy Directシリーズによる核酸の抽出性能は、核酸精製キットと同等であると考えられる。
＊1 Directタイプは、前処理なしで反応へ供した。
＊2 精製核酸には、室温処理タイプ／熱処理タイプと同一のRT-qPCR試薬を用いた。
＊3 RT-qPCR反応への検体持込量が理論上1.0 μl相当となるようにCt値を補正した。
なお、実際の検体持込量、実測Ct値、補正後Ct値は以下の通りである。
| 検体持込量 | 実測Ct値 | 補正後Ct値 | |
|---|---|---|---|
| Direct（RC805S/A） | 2.0 μl相当 | 24.10 | 25.10 |
| 室温処理（RC801S/A） | 1.0 μl相当 | 27.54 | 27.54 |
| 熱処理（RC803S/A） | 1.8 μl相当 | 27.32 | 28.17 |
| 精製Kit1 | 2.0 μl相当 | 26.10 | 27.10 |
| 精製Kit2 | 1.67 μl相当 | 28.44 | 29.17 |
＜試験条件＞
検出系：Respiratory Syncytial virus Primer/Probe Mix（製品コード RC501A）
リアルタイムPCR装置：Thermal Cycler Dice Real Time System IV（製品コード TP1000）
リアルタイムPCR条件：
| RC805S/A | ||||
| 90℃ 60℃ 95℃ 60℃ |
3 min. 5 min. 5 sec. 30 sec. |
45 cycles |
||
| RC801S/A、RC803S/A | ||||
| 52℃ 95℃ 95℃ 60℃ |
5 min. 10 sec. 5 sec. 30 sec. |
45 cycles |
||
