Easy Directシリーズ(RNA検出用)

核酸精製キットとの抽出性能比較

<対象製品>
Directタイプ:One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-treatment)(製品コード RC805S/A)
室温処理タイプ:One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-heat-treatment) (製品コード RC801S/A)
熱処理タイプ:One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Heat-treatment) (製品コード RC803S/A)

鼻腔ぬぐい液中のRSウイルスの抽出性能
鼻腔ぬぐい液にHuman respiratory syncytial virusをスパイクした検体を用いて、2種類の核酸精製キットによる処理またはEasy Directシリーズによる各種前処理*1を行い、各RT-qPCR試薬での反応に供した*2
その結果、Easy Directシリーズでは核酸精製キットと同程度のCt値*3が得られた。
Easy Directシリーズによる核酸の抽出性能は、核酸精製キットと同等であると考えられる。

Easy Directシリーズによる核酸の抽出性能
*1 Directタイプは、前処理なしで反応へ供した。
*2 精製核酸には、室温処理タイプ/熱処理タイプと同一のRT-qPCR試薬を用いた。
*3 RT-qPCR反応への検体持込量が理論上1.0 μl相当となるようにCt値を補正した。
  なお、実際の検体持込量、実測Ct値、補正後Ct値は以下の通りである。

  検体持込量 実測Ct値 補正後Ct値
Direct(RC805S/A) 2.0 μl相当 24.10 25.10
室温処理(RC801S/A) 1.0 μl相当 27.54 27.54
熱処理(RC803S/A) 1.8 μl相当 27.32 28.17
精製Kit1 2.0 μl相当 26.10 27.10
精製Kit2 1.67 μl相当 28.44 29.17

<試験条件>
検出系:Respiratory Syncytial virus Primer/Probe Mix(製品コード RC501A)
リアルタイムPCR装置:Thermal Cycler Dice Real Time System IV(製品コード TP1000)
リアルタイムPCR条件:
RC805S/A
90℃
60℃
95℃
60℃

3 min.
5 min.
5 sec.
30 sec.
45 cycles

RC801S/A、RC803S/A
52℃
95℃
95℃
60℃

5 min.
10 sec.
5 sec.
30 sec.
45 cycles

  Easy Directシリーズ(RNA検出用)