Easy Directシリーズ(DNA検出用)

検体中のDNAウイルスおよび細菌の検出性能

<対象製品>
Directタイプ:Easy Direct qPCR Kit (Non-treatment)(製品コード RC804S/A)
室温処理タイプ:Easy Direct qPCR Kit (Non-heat-treatment) (製品コード RC800S/A)
熱処理タイプ:Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment) (製品コード RC802S/A)

  1. 尿中のBKウイルスの検出
    尿にNATtrol BK Virus(ZeptoMetrix社)を100 copies/μlの濃度になるようスパイクし、各製品での反応に供したところ、いずれの製品でも検出ができた。
    Easy Directシリーズは、尿中のDNAウイルスの検出に使用可能と考えられる。
    尿中のBKウイルスの検出
    ① 生理食塩水+BKV標準ウイルス(コントロール)
    ② 尿+BKV標準ウイルス
    検出系:BK virus Primer/Probe Mix(製品コード RC524A)

  2. 全血中のBKウイルスの検出
    全血にNATtrol BK Virus(ZeptoMetrix社)を100 copies/μlの濃度になるようスパイクし、各製品での反応に供した。Directタイプ、室温処理タイプでは、全血においてもコントロールと同等のCt値での検出が可能であり、全血からのDNAウイルスの検出に使用可能と考えられる。一方、熱処理タイプでは、コントロールと比較し全血におけるCt値の遅れがみられた。
    熱処理は、RC803S/A取扱説明書に記載の【血清・全血検体の前処理方法について】に従い行った。
    注意:血清および全血からの検出については、熱処理タイプ(製品コード RC802S/A)の使用は推奨しておりません。詳細は取扱説明書をご確認ください。
    全血中のBKウイルスの検出
    ① 生理食塩水+BKV標準ウイルス(コントロール)
    ② 全血(抗凝固剤:EDTA)+BKV標準ウイルス
    検出系:BK virus Primer/Probe Mix(製品コード RC524A)

  3. 尿中のサルモネラ菌株の検出
    尿にサルモネラ菌株を適宜スパイクし、各試薬での反応に供したところ、いずれの製品でも検出ができた。
    Easy Directシリーズは、尿からの細菌の検出に使用可能と考えられる。
    尿中のサルモネラ菌株の検出
    ① 生理食塩水+BKV標準ウイルス(コントロール)
    ② 尿+サルモネラ菌株
    検出系: Salmonella侵入性因子関連遺伝子 invA検出用Primer/Probe

【上記1~3共通】
リアルタイムPCR装置:Thermal Cycler Dice Real Time System III(製品コード TP950)
リアルタイムPCR条件(3製品共通):
95℃30 sec.
95℃
60℃
5 sec.
30 sec.
 
45 cycles

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