<対象製品>
Directタイプ:Easy Direct qPCR Kit (Non-treatment) (製品コード RC804S/A)
室温処理タイプ:Easy Direct qPCR Kit (Non-heat-treatment)(製品コード RC800S/A)
熱処理タイプ:Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment) (製品コード RC802S/A)
- 喀痰上清中のレジオネラ菌株の抽出性能
喀痰上清*1にレジオネラ菌株をスパイクした検体を用いて、2種類の核酸精製キットによる処理またはEasy Directシリーズによる各種前処理*2を行い、qPCR試薬(Easy Direct qPCR Mix w/UNG)での反応に供した*3。
その結果、Easy Directシリーズでは核酸精製キットと同程度のCt値*4が得られた。
Easy Directシリーズによる核酸の抽出性能は、核酸精製キットと同等であると考えられる。
- 尿中のBKVの抽出性能
ヒトの尿にNATtrol BK Virus(ZeptoMetrix社)を100 copies/μlの濃度になるようスパイクした検体を用いて、2種類の核酸精製キットによる処理またはEasy Directシリーズによる各種前処理*2を行い、qPCR試薬(Easy Direct qPCR Mix w/UNG)での反応に供した*3。
その結果、Easy Directシリーズでは核酸精製キットと同程度のCt値*4が得られた。
Easy Directシリーズによる核酸の抽出性能は、核酸精製キットと同等であると考えられる。
*1 喀痰を同容量の生理食塩水に懸濁し、上清を使用した。
*2 Directタイプは、前処理なしで反応へ供した。
*3 精製核酸にも、Easy DirectシリーズのqPCR試薬を用いた。
*4 qPCR反応への検体持込量が理論上1.0 μl相当となるようにCt値を補正した。
なお、実際の検体持込量、実測Ct値、補正後Ct値は以下の通りである。
<試験条件>
検出系:
- レジオネラ菌:レジオネラ遺伝子検出用Primer/Probe
- BKV:BK virus Primer/Probe Mix(製品コード RC524A)
リアルタイムPCR装置:Thermal Cycler Dice Real Time System IV(製品コード TP1000)
リアルタイムPCR条件:
95℃ | 30 sec. |
95℃ 60℃ | 5 sec. 30 sec. |
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45 cycles |