熱処理タイプを用いた血液検体中の細菌DNAの検出（従来品とバージョンアップ品の比較）
【対象製品】
従来品：Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment)（製品コード RC802S/A）
バージョンアップ品：Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment) Ver.2（製品コード RC806S/A）
【概要】
血清および全血（抗凝固剤：ヘパリンナトリウム、EDTA、クエン酸ナトリウム）にサルモネラ属菌株を適宜スパイクし反応に供した。検出にはSalmonella侵入性因子関連遺伝子invA検出用Primer/Probeを用い、反応はN＝2で実施した。
【結果】
従来品と比較し、バージョンアップ品は、総じてより低いCt値が得られており、感度が向上した。また、全血（クエン酸ナトリウム）において、従来品はほとんど検出しなかったが、バージョンアップ品は検出することができた。
図1．各種血液検体における増幅曲線
従来品を用いた反応をオレンジ色、バージョンアップ品を用いた反応を水色で示す（N=2）。
表2．各検体におけるCt値
各検体における平均Ct値、ΔCt（バージョンアップ品を用いた反応の平均Ct値から従来品を用いた反応の平均Ct値を引いた値）を示した。
*Ct値検出なしを示す。
**N.D.の場合、Ct値を45としてΔCtを算出した。
【方法】
リアルタイムPCR装置：Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950）
リアルタイムPCR条件：
従来品：Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment)（製品コード RC802S/A）
バージョンアップ品：Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment) Ver.2（製品コード RC806S/A）
【概要】
血清および全血（抗凝固剤：ヘパリンナトリウム、EDTA、クエン酸ナトリウム）にサルモネラ属菌株を適宜スパイクし反応に供した。検出にはSalmonella侵入性因子関連遺伝子invA検出用Primer/Probeを用い、反応はN＝2で実施した。
【結果】
従来品と比較し、バージョンアップ品は、総じてより低いCt値が得られており、感度が向上した。また、全血（クエン酸ナトリウム）において、従来品はほとんど検出しなかったが、バージョンアップ品は検出することができた。
図1．各種血液検体における増幅曲線
従来品を用いた反応をオレンジ色、バージョンアップ品を用いた反応を水色で示す（N=2）。
表2．各検体におけるCt値
各検体における平均Ct値、ΔCt（バージョンアップ品を用いた反応の平均Ct値から従来品を用いた反応の平均Ct値を引いた値）を示した。
| 検体 | 従来品 RC802S/A | バージョンアップ品 RC806S/A | ΔCt |
| Ct 値 | Ct 値 | ||
| 血清1 | 37.52 | 34.15 | -3.38 |
| 血清2 | 37.39 | 33.25 | -4.14 |
| 血清3 | 37.94 | 34.83 | -3.11 |
| 血清4 | 38.04 | 34.58 | -3.46 |
| 血清5 | 36.33 | 33.41 | -2.92 |
| 全血 Heparin 1 | 38.78 | 34.86 | -3.92 |
| 全血 Heparin 2 | 36.84 | 33.37 | -3.47 |
| 全血 Heparin 3 | 38.03 | 33.97 | -4.06 |
| 全血 EDTA 1 | 42.20 | 38.12 | -4.08 |
| 全血 EDTA 2 | 40.66 | 36.81 | -3.85 |
| 全血 EDTA 3 | 39.89 | 38.10 | -1.79 |
| 全血 クエン酸ナトリウム | N.D.* | 38.11 | -6.90** |
**N.D.の場合、Ct値を45としてΔCtを算出した。
【方法】
リアルタイムPCR装置：Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950）
リアルタイムPCR条件：
| 95℃ 95℃ 60℃ |
30 sec. 5 sec. 30 sec. |
45 cycles |
