<対象製品>
◎病原体関連遺伝子検出用プライマー・プローブ、陽性コントロール
Influenza virus Primer/Probe Mix(製品コード RC500A)
Influenza virus Positive Control RNA(製品コード RC600A)
◎
Easy Directシリーズ
Directタイプ:One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-treatment)(製品コード RC805S/A)
室温処理タイプ:One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Non-heat-treatment)(製品コード RC801S/A)
熱処理タイプ:One Step Easy Direct RT-qPCR Kit (Heat-treatment) Ver.2(製品コード RC807S/A)
【方法】
Influenza virus Positive Control RNA 2 μlを鋳型として、Influenza virus Primer/Probe MixとEasy Directシリーズを組み合わせてリアルタイムPCRによる検出を行った。
※精製核酸を用いた反応のため、Easy Directシリーズの取扱説明書に記載の前処理工程は実施していない。
【反応条件】
Thermal Cycler Dice Real Time System IV(製品コード TP1000)を使用して以下の条件でリアルタイムRT-PCR反応を実施した。
Directタイプ |
90℃ 60℃ 95℃ 60℃ |
|
3分 5分 5秒 30秒 |
|
45 cycles |
室温処理タイプ/熱処理タイプ |
52℃ 95℃ 95℃ 60℃ |
|
5分 10秒 5秒 30秒 |
|
45 cycles |
【結果】
陰性コントロールとしてRNase Free H
2Oを添加した反応では増幅は見られず、陽性コントロールを添加した反応では良好な増幅が確認された。よってInfluenza virus Primer/Probe MixおよびInfluenza virus Positive Control RNAがEasy Directシリーズで使用可能であることが示された。