対象製品:Easy Direct qPCR Kit (Heat-treatment) Ver.2(製品コード RC806A:以下、本製品)
目的:動物の糞便中に含まれるウイルスA遺伝子の有無を確認する。
検体種:動物の糞便
検出ターゲット・検出対象遺伝子:ウイルスAの野生株およびワクチン株
| 検出対象 | 蛍光検出フィルター |
| 野生株 | FAM |
| ワクチン株 | VIC |
使用した装置:CFX Opus 96 Real-Time PCR System(Bio-Rad社)
方法:
糞便懸濁液18 μlに、Easy Direct Solution 2 μlを加えて混合し、95℃で5分間熱処理を行った。得られた前処理済み検体を、リアルタイムPCR反応に供した。
なお、反応組成、反応条件は取扱説明書に準じ、一部条件を調整して実施した。
結果:
精製核酸である各陽性コントロール(野生株、ワクチン株)はいずれも期待通り検出された。
さらに、糞便検体①および②の両方から、ウイルスAのワクチン株が検出されたことから、対象動物がワクチン接種済みであることが示唆された。
また、本製品を用いて糞便検体からのウイルスA遺伝子の検出が可能であることを確認した。
※「ND」はCt値検出なし、「―」は指数増幅が確認されなかったことを示す。
野生株(FAM)
ワクチン株(VIC)
製品に関するコメント:
糞便からのDNA抽出・精製工程が省略できるため、全体の検査時間を約30分~1時間短縮することができた。
注意事項:
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