標準プロトコール
（製品コード 9180）
- 使用前にReagent AならびにReagent Bを静かに転倒混和し、1試料あたりReagent Aを20 μl、Reagent B を4 μl、滅菌精製水を20 μl混合し、試薬Mix を調製する*1。
（Reagent A：Reagent B：滅菌精製水＝ 5：1：5） - 試料1～10 mg *2を0.2 mlマイクロチューブに採取する。
- 1. で調製した試薬Mix 44 μlを添加し、試料を浸す。*3
- 37℃で6分、続けて95℃で3分間のインキュベートを行う。*4
- 滅菌精製水を80 μl加え、ピペッティングで緩やかに混和する。
- 上清（DNA抽出液）*5をPCR*6のテンプレートとして使用する。 （PCR 反応液に対し、1/10量までDNA抽出液を添加可能です。*7）
- 不溶物（組織）がチューブ内に残っている場合、上清を別のチューブに移して保存する。*8
| *1 | 処理する試料の体積は、最大で抽出液の1/2（試料と試薬Mix が目視で等量）以下を目安とし、採取量に応じて試薬Mixの量を増減してください。 この場合、試薬Mix の混合比率を変更しないようにご注意ください。 |
| *2 | 試料により最適処理量が異なります。Q＆AのQ2をご参照ください。 |
| *3 | 試料は、試薬Mix に浸るようにチップの先などでチューブの底に入れてください。 |
| *4 | インキュベーション後、チューブのふたに抽出液が付着している場合は、卓上遠心機などを利用して軽く遠心したのちに、チューブのふたを開けるようにしてください。 |
| *5 | 抽出液に不溶物が混在している場合は、軽く遠心分離を行ったのち上清をご使用ください。 |
| *6 | PCRに使用する酵素は、Tks Gflex DNA Polymerase（製品コード R060A/B）、MightyAmp DNA Polymerase Ver.2（製品コード R071A/B）、TaKaRa Ex Taq Hot Start Version（製品コード RR006A/B）、またはPrimeSTAR GXL DNA Polymerase（製品コード R050A/B）をご使用ください。rTaqでは増幅効率が悪い場合があります。 |
| *7 | 試薬Mixに対して試料が過剰であれば、得られた抽出液によりPCR反応が阻害されることがあります。この場合、抽出液を滅菌精製水で希釈したものを用いることで、PCR反応が改善される可能性があります。あらかじめ、使用するPCR条件で、最適のDNA抽出液の量を予備検討していただくことをお勧めします。 |
| *8 | DNA抽出液は使用まで4℃で保存し、早めにご使用ください。直ちに使用されない場合は、－20℃で保存してください。 |
【標準プロトコール】
Reagent A ：Reagent B ：滅菌精製水を5：1：5の割合で混和する。（試薬Mix）
↓
1～10 mgの組織を 0.2 mlマイクロチューブに入れる。
↓
試薬Mixを44 μl加える。
↓
37℃ 6分、95 ℃ 3分インキュベート
↓
滅菌精製水を80 μl加える。
↓
DNA抽出液（上清）を、PCR反応に用いる。
↓
（PCRの反応液量に対し1/10量まで持ち込み可）
↓
1～10 mgの組織を 0.2 mlマイクロチューブに入れる。
↓
試薬Mixを44 μl加える。
↓
37℃ 6分、95 ℃ 3分インキュベート
↓
滅菌精製水を80 μl加える。
↓
DNA抽出液（上清）を、PCR反応に用いる。
↓
（PCRの反応液量に対し1/10量まで持ち込み可）
