Application1：Corysteinによるインスリンの還元
操作手順
0.1 mg/ml インスリン溶液（2 mM EDTAを含む0.1 Mリン酸カリウム緩衝液、pH7.0）* 1.0 ml、Corystein溶液0.1 ml、 E. coli thioredoxin溶液0.1 mlを混合し、100 mM DTT 4 μl添加により反応を開始する。室温で650 nmにおける濁度の増加を測定する。
* 1 N塩酸に溶解し、直ちに1 N水酸化ナトリウムで中和した後、所定の濃度に調整する。
* 1 N塩酸に溶解し、直ちに1 N水酸化ナトリウムで中和した後、所定の濃度に調整する。
結果
Corystein 100 μg単独添加、E. coli thioredoxin 20 μg単独添加でほぼ同等のインスリン還元活性を示した。またCorystein 25 μgとE. coli thioredoxin 20 μgを併用添加した場合、E. coli thioredoxin 40 μg単独添加と同等の活性が得られ、相乗効果が確認された（表1 濁度上昇までの時間参照）。
表1 Corysteinおよびthioredoxinによるインスリンの還元
表1 Corysteinおよびthioredoxinによるインスリンの還元
| Corystein（μg） | thioredoxin（μg） | Lag time required for increase of turbidity （min） | Average rate for increase of turbidity （ΔA650/min） |
| 100 | 0 | 10.27 | 0.067 |
| 0 | 20 | 11.65 | 0.073 |
| 0 | 40 | 7.08 | 0.11 |
| 12.5 | 20 | 7.85 | 0.1 |
| 25 | 20 | 7.18 | 0.11 |
| 37.5 | 20 | 6.13 | 0.12 |
| 50 | 20 | 5.95 | 0.12 |
