Heparan Degrading Enzyme Assay Kit

共存物質の影響

本キットはDOC法によるCBD-FGFとヘパラン硫酸との結合親和性を利用した測定法であるため、系の中にFGFと強い親和性のある物質が共存していると、未消化のビオチン化ヘパラン硫酸が結合できず全く発色しない。インヒビタースクリーニングなどで、添加因子を系を加える場合はあらかじめ妨害がないかを確かめてください。
方法は、測定サンプルの代わりに添加因子だけをビオチン化ヘパラン硫酸とインキュベートし、CBD-FGF固定化プレートに投入して、無添加と変わらないことを調べることでわかる。一方、この阻害作用を逆さに利用して、FGFとの親和性物質のスクリーニングおよびその相互作用の研究にも本キットは利用できる。これまでに本キットを用いて検討した共存物質の影響を以下に示す。
FGFと相互作用するもの デキストラン硫酸、コンドロイチン硫酸B、カラギナンIota、k、l
FGFと相互作用しないもの コンドロイチン硫酸A、コンドロイチン硫酸C、コンドロイチン硫酸D、ケラタン硫酸、プルラン、ガラクタン、Suramin9)

  Heparan Degrading Enzyme Assay Kit