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PCR
ダイレクトPCR例7:口腔細胞懸濁液
PCR
ダイレクトPCR例7:口腔細胞懸濁液
MightyAmp DNA Polymerase Ver.2(製品コード R071A/B)
Buffer A(TE Buffer)
Buffer B(TE Buffer+Proteinase K)
(弊社比較データ)
A:
A社動物組織用PCR酵素
B:
MightyAmp Ver.2
C:
B社阻害物質耐性PCR酵素
レーン
サンプル量
1.
0.5 μl
2.
1 μl
3.
2 μl
M.
pHY Marker
口腔細胞懸濁液の調製法
(1)滅菌済み綿棒で頬の内側を10回こする。
(2)Buffer(AまたはB)の入ったチューブに綿棒を入れて、5回攪拌し、綿棒をチューブの壁にあててしぼる。
Buffer A:TE Buffer 300 μl
Buffer B:TE Buffer 300 μl+20 mg/ml Protinase K 1.5 μl
(3)BufferBを使用したサンプルのみ、Proteinase K失活のため、98℃、2分の処理を行う。
調製した口腔細胞懸濁液(0.5 μl、1 μlまたは2 μl)を直接反応系(20 μl)に添加
ターゲット:p53遺伝子 515 bp
PCR条件
98℃ 2分
↓
98℃ 10秒
35サイクル
60℃ 15秒
68℃ 30秒
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(製品コード TP600)使用
電気泳動量 3 μl
ゲル 1% Agarose L03「TAKARA」
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