AAVベクターを用いた鳴禽類Zebra Finch脳への遺伝子導入
方法
AAVベクターの調製
HEK293細胞にリン酸カルシウム法によりプラスミドを導入し、AAV9-GFPウイルスベクターを産生させた。ウイルスベクターの精製は、15 cmシャーレ10枚分の293細胞について、AAVpro Purification Kit (All Serotypes)（製品コード 6666）のキット付属分1/4量を使用し、最終的に100 μlの精製AAV9-GFPウイルスベクター液を得た。
AAVベクターの鳴禽類Zebra Finch脳への投与
調製したAAV9-GFPウイルスベクター液を、鳴禽類Zebra Finch雄の脳の2か所（歌神経核Area X、歌神経核RA＊）に1 μlずつインジェクションした。 インジェクションから2週間後に脳を摘出し、固定・凍結した後、切片を作製した。* 歌神経核Area X：哺乳類で大脳基底核に相当する部分
歌神経核RA：哺乳類で大脳皮質（第5層）に相当する部分
結果
GFPの発現を蛍光顕微鏡により観察したところ、ベクター投与部位に蛍光が確認できた。
データご提供：北海道大学 大学院理学研究院 生物科学部門 行動神経生物学分野 和多 和宏 先生
 図A：歌神経核Area X |
 図B：歌神経核RA |
データご提供：北海道大学 大学院理学研究院 生物科学部門 行動神経生物学分野 和多 和宏 先生
