Takara Stable Competent Cells

Poly(A)安定性・反復配列安定性の比較

Competent Cells

Poly(A) length [bp]

Poly(A) full length ratio

E. coli JM109
Competent Cells

105	105	43	66	105	44	105	22	27	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	32	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	48	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	105	46	105	45	105

81.25％
(39/48)

Takara Stable
Competent Cells

105	105	105	65	105	105	105	105	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	105	105	105	105	105	105
105	105	22	105	105	105	105	105	105	105	105	105
105	105	105	105	105	105	66	105	105	105	105	105

93.75％
(45/48)

図1. Poly(A)安定性の比較
105 bpのpoly(A)をコードするプラスミドDNAをE. coli JM109 Competent Cells（製品コード 9052）およびTakara Stable Competent Cells（製品コード 9132）に形質転換し、LBプレートで培養後48個のコロニーからプラスミドを抽出した。抽出したプラスミドをそれぞれサンガーシーケンスし、poly(A)長を測定した。Poly(A)の脱落が起こり105 bpより短くなっていたpoly(A)長を赤字で示している。
48個のプラスミドのうち、JM109ではpoly(A)完全長を有するプラスミドが39個得られたのに対し（Poly(A) full length ratio: 39/48＝81.25％）、Takara Stable Competent Cellsでは45個得られた（Poly(A) full length ratio: 45/48＝93.75％）。
この結果より、Takara Stable Competent CellsではJM109に比べてPoly(A)の脱落頻度が低減されていることが示された。

図2. 反復配列安定性の比較
制限酵素処理によって切断・抽出できる32 bp×15回と32 bp×20回の反復配列をコードするプラスミドDNA(左図)を、E. coli JM109 Competent Cells（製品コード 9052）およびTakara Stable Competent Cells（製品コード 9132）に形質転換してLBプレートで培養後、得られたコロニーからプラスミドを抽出した。
抽出したプラスミドの長さ、および制限酵素処理時（Sal I、EcoR V、EcoR I）の検出バンドパターンをアガロースゲル電気泳動で確認した結果、正常な配列を維持していると考えられるプラスミドはJM109の場合、96個中64個（66.7％）であったのに対し、Takara Stable Competent Cellsでは120個中97個（80.8％）であった。この結果より、Takara Stable Competent CellsはJM109に比べて反復配列の安定性が高いことが示された。

Takara Stable Competent Cells