製品説明
Stellarコンピテントセルは外来のメチル化DNAを切断する遺伝子群mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrAを欠失している。さらに、非常に高い形質転換能力を持っているため、メチル化されたDNAのクローニングから、遺伝子ライブラリーの作製、サブクローニング等に至るまで幅広い用途に使用できる。また、長鎖プラスミドDNAの形質転換においても高い効率が得られ、同様の遺伝子型を持つ他のコンピテントセルと比較してコロニー形成速度も速いため、10 kb以上のDNAのクローニング、ライブラリー作製も行える。pUC系プラスミドでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal添加により組換え体の選別が容易となる。F－であるため、BAC、フォスミドベクターにも使用できる。
Stellar (dam－/dcm－)コンピテントセルは、本来大腸菌が持っているメチル化遺伝子dam、dcmを欠損しているため、DNAが大腸菌によりメチル化されない。本製品で調製されたplasmidはdamまたはdcm methylaseの影響を受ける制限酵素で切断できる。なお、dam、recAの2重変異株は致死になるため、本株はrecA＋株になっている。このため、反復配列をもつような外来DNAはrecA遺伝子により、組換えが起こることが予想される。
Stellar (dam－/dcm－)コンピテントセルは、本来大腸菌が持っているメチル化遺伝子dam、dcmを欠損しているため、DNAが大腸菌によりメチル化されない。本製品で調製されたplasmidはdamまたはdcm methylaseの影響を受ける制限酵素で切断できる。なお、dam、recAの2重変異株は致死になるため、本株はrecA＋株になっている。このため、反復配列をもつような外来DNAはrecA遺伝子により、組換えが起こることが予想される。
表1. コンピテント細胞の特徴
a：ケミカルコンピテント
b：エレクトロコンピテント
| Strain | 形式転換効率／遺伝子型／用途 | 形状 |
| Stellar | F－, endA1, supE44, thi-1, recA1, relA1, gyrA96, phoA, Φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF)U169, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, λ－ | a, b |
| Stellar (dam－/dcm－) | F－, ara, Δ(lac-proAB)[Φ80dlacZΔM15], rpsL(str), thi, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, dam, dcm | a |
b：エレクトロコンピテント
保存
#636763、636764、636765、636766、636767
competent cells：－70℃
その他のコンポーネント：－20℃
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