In-Fusion® HD Cloning Kit

簡単・便利なディレクショナルクローニングキット
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
639648

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library
10回 ¥25,000
¥20,000
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9648N
639649

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library
50回 ¥119,000
¥95,200
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9649N
639650

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library
100回 ¥204,000
¥163,200
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9650N
638933

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit
500回 ¥762,000
説明書・データシート・ベクター情報
Z8933N
639633

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit w/Cloning Enhancer
10回 ¥29,000
説明書・データシート・ベクター情報
Z9633N
639634

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit w/Cloning Enhancer
50回 ¥131,000
説明書・データシート・ベクター情報
Z9634N
639635

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit w/Cloning Enhancer
100回 ¥233,000
説明書・データシート・ベクター情報
Z9635N
639642

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit w/Competent Cells
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
10回 ¥48,000
¥38,400
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9642N
639643

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit w/Competent Cells
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
50回 ¥168,000
¥134,400
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9643N
639644

CLN

Clontech
In-Fusion® HD Cloning Kit w/Competent Cells
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
100回 ¥271,000
¥216,800
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9644N
639613

CLN

Clontech
Cloning Enhancer
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library
50 μl ¥27,000
¥21,600
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9613N
639614

CLN

Clontech
Cloning Enhancer
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library
100 μl ¥40,000
¥32,000
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9614N
639615

CLN

Clontech
Cloning Enhancer
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library
200 μl ¥71,000
¥56,800
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z9615N
※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。
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製品説明

ClontechのIn-Fusionクローニングシステムは、それぞれのDNA断片の末端15塩基が相同であれば、短時間に効率よく、In-Fusion酵素がそれらのDNA断片を融合することができる。制限酵素切断や平滑末端化処理、リガーゼ反応などを行うことなく、1ステップの反応でPCR断片を任意のベクターにクローニングできる。In-Fusion HD Cloning Kitはプレミックスタイプであり、反応時間はわずか15分、クローニング効率が高く、質の高いクローニングを行える。
効率のよいIn-Fusionクローニングなら、最小限のスクリーニングで適切なクローンが得られる。また、2つのDNA断片の結合のみならず、1度の反応で4つのDNA断片を適切に連結することも可能である(1)。In-Fusionクローニング法はハイスループット(HTP)な系にも有用であり、ハーバード大学医学部(2)やスタンフォード大学医学部(3)、オックスフォード大学(4)などのHTPプロジェクトでも活躍している。

In-Fusion反応の概略

横にスクロールできます
In-Fusion反応の概略 PrimeSTAR Max DNA Polymerase PrimeSTAR GXL DNA Polymerase
図1. In-Fusionクローニング

  1. 利用するベクターの末端配列に相同な15塩基を、目的遺伝子増幅用プライマーの5'末端に付加し、目的遺伝子をPCR増幅する。
  2. 増幅産物がシングルバンドであればCloning Enhancer処理*1を行い、複数のバンドが見られる場合はゲルから精製して、In-Fusion酵素で線状化ベクター*2と結合する(In-Fusion反応:50℃、15分)。
    w/Cloning Enhancerタイプの製品に含まれるCloning Enhancerは、PCR産物をそのままIn-Fusion反応に使用するための独自の前処理試薬である。PCR終了後の反応液に本試薬を加えて30分間インキュベートするだけで、そのままIn-Fusion反応に使用できる。PCR産物の精製ステップが不要となり、試料のロスも少なくなる。
  3. In-Fusion反応液で形質転換を行い、目的クローンをスクリーニングする。
*1 Cloning Enhancerを含むセットが便利です(製品コード 639633~639635)。Cloning Enhancerのみの別売もあります(製品コード639613~639615)。 In-Fusionクローニング製品選択ガイド *2 線状化ベクターは、制限酵素処理や全長のPCR増幅により調製してください。

他社同等品との違いはこちら
>>In-Fusionと他社シームレスクローニングキットは何が違うの?

In-Fusionプライマーの設計

In-Fusionクローニング用プライマーの設計および目的DNA断片の増幅は、基本的に通常のPCRプライマーの設計、PCR増幅と同じである。唯一の違いは、利用するベクターの末端配列に相同な15塩基を、配列特異的プライマーの5’末端に付加することである(下図参照)。

お手持ちのベクターに対するIn-Fusion用プライマーの設計には、便利なオンラインツール「In-Fusion HDプライマー設計サイト(The Primer Design Tool for In-Fusion HD Cloning Kit)」をご利用ください。

In-Fusion Cloning プライマーバナー


In-Fusion Cloning プライマー設計・注文

In-Fusionクローニング製品選択ガイド

 

内容

In-Fusion HD Cloning Kit*2
(製品コード 639648、639649、639650、638933)
・5×In-Fusion HD Enzyme Premix
・pUC19 Control Vector, linearized
・2 kb Control Insert

In-Fusion HD Cloning Kit w/Cloning Enhancer*2
(製品コード 639633、639634、639635)
・5×In-Fusion HD Enzyme Premix
・pUC19 Control Vector, linearized
・2 kb Control Insert
・Cloning Enhancer*1


*1PCR産物をそのままIn-Fusion反応に使用するための前処置試薬
*2これらのキットにはコンピテントセルが添付されていません。形質転換には、効率の高いE. coli HST08 Premium Competent Cells(製品コード 9128)Stellar Competent Cells(製品コード 636763)などをご利用ください。
また、これらのキットとStellar Competent Cellsがそれぞれセットになった製品、In-Fusion HD Cloning Kit w/Competent Cells(製品コード 639642~639644)もご利用ください。

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オンラインツール

クローニング実験ハンドブック


クローニング実験に使用する一連の試薬を簡単に選択! フローチャート検索をぜひご活用ください。

クローニング操作の基本フロー

Application

ユーザー様実施例:In-Fusion Cloning Kitを用いた4断片マルチクローニングの成功
In-Fusion® HD Cloning KitとA社同等品の比較実験(TB USA社取得データ)
ユーザー様実施例:In-Fusion® Cloning Systemを用いて3つのPCR productからベクターを構築
ユーザー様実施例:3つのインサートをIn-Fusion® Cloning Systemで同時にクローニング(他社同等キットとの比較)
ユーザー様実施例:4つのインサートをIn-Fusion® Cloning Systemで同時にクローニング
ユーザー様実施例:In-Fusion® Cloning Kitと他社同タイプキットの比較実施例
ユーザー様実施例:In-Fusion® Cloning Systemを用いたゲノム編集ノックイン用ドナーベクターの構築(3断片のマルチクローニング)
ユーザー様実施例:In-Fusion® Cloning Kitを使用したAAVベクターの改変
長鎖フラグメントのクローニング
複数フラグメントの同時クローニング
In-Fusion反応におけるインサートサイズとクローニング効率
In-Fusion簡易プロトコールによる2断片の同時クローニング
ユーザー様実施例:P2A配列の挿入
ユーザー様実施例:人工ライブラリの作製
ユーザー様実施例:訳あって、PCR産物を制限酵素処理できない時
ユーザー様実施例:遺伝子のクローニング

Technical Notes

In-Fusionを用いた変異の少ない正確な目的配列のクローニング(日本語)
モノクローナル抗体開発のための迅速、確実なハイスループットクローニング(日本語)
In-Fusionを用いたsgRNAの簡単クローニング(日本語)
In-Fusionクローニングによる簡単な遺伝子設計(日本語)
In-Fusion 技術を用いたシグナル伝達系タンパク質ドメイン発現
コンストラクトの正確なハイスループット・クローニング(日本語)

クロンテック製品の組合せ使用による簡単・迅速なタンパク質の発現と精製(日本語)
In-Fusionによる複数断片の正確かつ効率的な同時クローニング(英語)
モノクローナル抗体開発で迅速、確実なハイスループット・クローニングが可能(英語)

注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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