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図. mES細胞でEF-1αプロモーターにより発現されたAcGFP1は、CMVプロモーターよりも高い発現量を示す CMVプロモーターまたはEF-1αプロモーターで制御されるAcGFP1を発現するレンチウイルスを用いて、マウス胚性幹細胞E14(パネルA)およびD3(パネルB)へ形質導入した。FL1チャンネルを用いたFACS解析により感染5日後のAcGFP1発現量を観察した結果、EF-1αプロモーターで制御されるAcGFP1はどちらの細胞においてもCMVプロモーターよりも高い発現量を示した。この結果は、Wangらの報告3と同様、EF-1αプロモーターがCMVプロモーターよりも幹細胞内でサイレンシングを受けにくいためと考えられる。 |
製品名 | 製品コード | 蛍光タンパク質 | IRES | 精製タグ |
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pEF1α-AcGFP1-C1 Vector | 631974 | ○ | - | - |
pEF1α-AcGFP1-N1 Vector | 631973 | ○ | - | - |
pEF1α-DsRed-Express2 Vector | 631979 | ○ | - | - |
pEF1α-DsRed-Monomer-C1 Vector | 631977 | ○ | - | - |
pEF1α-DsRed-Monomer-N1 Vector | 631978 | ○ | - | - |
pEF1α-E2-Crimson Vector | 631981 | ○ | - | - |
pEF1α-mCherry-C1 Vector | 631972 | ○ | - | - |
pEF1α-mCherry-N1 Vector | 631969 | ○ | - | - |
pEF1α-HA Vector | 631992 | - | - | ○ |
pEF1α-Myc Vector | 631991 | - | - | ○ |
注意: | IRES配列上流のMCSに翻訳されるORFをクローニングしていない状態では、蛍光タンパク質の発現が弱く、蛍光顕微鏡による検出が難しい場合がある。IRES前のMCSに約0.7~1.2 kbの遺伝子を挿入して使用することをお勧めする。 |
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