Easy Yeast Plasmid Isolation Kitは酵母(
S. cerevisiae)からプラスミドDNAを簡便かつ効率的に抽出、単離するためのキットである。高活性な細胞壁溶解酵素処理とSDS/アルカリ処理により粗溶菌液を作製し、シリカメンブレンタイプのYeast Plasmidスピンカラムを用いて粗溶菌液に含まれる不純物の除去とプラスミドDNAの溶出を行う(図1)。回収したプラスミドDNAは大腸菌の形質転換やPCRの鋳型としてすぐに使用できる。
図1. Easy Yeast Plasmid Isolation Kitのプロトコール概要 内容
・Zymolyase Suspension
・ZYM Buffer
・10 mM EDTA
・Y1 Resuspension Buffer
・Y2 Lysis Buffer
・Y3 Neutralization Buffer
・Y4 Wash Buffer Concentrate
・YE Elution Buffer
・Yeast Plasmid Spin Columns
・Collection Tubes (2 ml)
・RNase A (Lyophilized)
保存
・Zymolyase Suspension:-20℃*1
・ZYM Buffer:-20℃*1
・その他のコンポーネント:室温*2
(注意)
*1 一旦融解した後は4℃で保存してください。
*2 コンポーネント中のRNase Aをバッファーで溶解した後は4℃で保存してください。