ゲノムDNAなどを沈殿させて除去、フェノールを使用したRNA精製試薬
- 様々なサンプルからtotal RNAを抽出できる有機溶剤ベースのRNA抽出用試薬
- クロロホルム不要、水層と有機溶剤層の分離不要の簡単プロトコール
- small RNAを含む高純度のtotal RNAを高収率に抽出
- small RNAとlarge RNAを別々のチューブに分けて回収することも可能
製品説明
NucleoZOLは細胞、組織、酵母、細菌、ウイルスなど、様々なタイプのサンプルからRNAを抽出する試薬である。
一般的な有機溶剤ベースのRNA抽出試薬は試料を溶解後、クロロホルムを添加し溶液を二層に分離して水層を回収するが、本製品は二層分離の必要がなく、シンプルな一層の抽出操作によってtotal RNA、small RNAを抽出することができる。DNA、タンパク質などの夾雑物質は沈殿として除去できる。
二層に分離して水層を分取する必要がないため、サンプルのロスやフェノール層のキャリーオーバーの心配がなく、高純度のRNAを収率良く得ることができる。small RNAを含むtotal RNAを1チューブで回収できる他、small RNAとlarge RNAを別々のチューブに回収することも可能である。
NucleoSpin RNA Set for NucleoZOLは、NucleoZOLで抽出し、遠心によりDNAやタンパク質を除いた上清からsmall RNAを含むtotal RNAを精製するスピンカラムとバッファーのセットである。本製品（NucleoZOLは含まれない）にはNucleoZOLを500 μl使用して抽出した溶液を50回精製できるスピンカラムとバッファーが含まれる。本製品を用いると、NucleoZOLで抽出した溶液より、迅速、簡便にRNAを精製することが可能である。
一般的な有機溶剤ベースのRNA抽出試薬は試料を溶解後、クロロホルムを添加し溶液を二層に分離して水層を回収するが、本製品は二層分離の必要がなく、シンプルな一層の抽出操作によってtotal RNA、small RNAを抽出することができる。DNA、タンパク質などの夾雑物質は沈殿として除去できる。
二層に分離して水層を分取する必要がないため、サンプルのロスやフェノール層のキャリーオーバーの心配がなく、高純度のRNAを収率良く得ることができる。small RNAを含むtotal RNAを1チューブで回収できる他、small RNAとlarge RNAを別々のチューブに回収することも可能である。
NucleoSpin RNA Set for NucleoZOLは、NucleoZOLで抽出し、遠心によりDNAやタンパク質を除いた上清からsmall RNAを含むtotal RNAを精製するスピンカラムとバッファーのセットである。本製品（NucleoZOLは含まれない）にはNucleoZOLを500 μl使用して抽出した溶液を50回精製できるスピンカラムとバッファーが含まれる。本製品を用いると、NucleoZOLで抽出した溶液より、迅速、簡便にRNAを精製することが可能である。
NucleoZOL
* RNA integrity number
| 原理 | One-phase抽出 |
| 形状 | 有機溶剤試薬 |
| サンプル量 （NucleoZOL 1 mlあたり） |
培養細胞、細菌、酵母： 1×107 動物組織、植物組織： 100 mg 体液（ウイルス）： 0.4 ml |
| 精製サイズ | small RNA：＜200 bases large RNA：＞200 bases |
| 回収量（total RNA） | 6～8 μg/mg（肝臓） 3～4 μg/mg（腎臓、脾臓） 0.5～1.5 μg/mg（筋肉、脳、肺） 4～10 μg/106 cells（培養細胞） |
| 回収量（large RNA） | 5～7 μg/mg（肝臓） 3～4 μg/mg（腎臓、脾臓） 0.5～1.5 μg/mg（筋肉、脳、肺） 3～8 μg/106 cells（培養細胞） |
| A260/280 (total RNA) |
1.8～2.1 |
| 標準的RIN＊ | ＞9 |
| 回収液量 | 任意 |
| 精製時間 | ＜1時間 |
NucleoSpin RNA Set for NucleoZOL
| 原理 | シリカメンブレン法 |
| 形状 | スピンカラム |
| サンプル量 | ≦500 μl NucleoZOL sample |
| 精製サイズ | small RNA：10～200 bases、 large RNA：＞200 bases |
| 回収率 | 85～95％ |
| 溶出液量 | 60 μl |
| 精製時間 | ＜1時間 |
| 結合容量 | 200 μg |
図1．筋組織サンプルからのRNA抽出
NucleoZOLを用いて、マウス心臓組織60 mgよりtotal RNAを抽出し、Agilent Bioanalyzerで分析を行った。その結果、RIN値 9の分解の少ないRNAが得られていることが分かった。
（マッハライナーゲル社比較data）
図2．NucleoZOLのRNA収率
様々なサンプルからRNAを抽出し、他社の二層分離の製品とNucleoZOLによるRNA収量を比較した。
RNA収量はqRT-PCRにより測定し、NucleoZOLの収量を100%として図に示した。
NucleoZOLで抽出したほうが、酵母を除くすべてのサンプルで良好な収量を示した。
（マッハライナーゲル社比較data）
図3．抽出RNAへのDNA混入量とフェノールのキャリーオーバー
NucleoZOL、または他社製品を用いてラット肺組織50 mgよりtotal RNAを抽出した。
| A | ： | DNAの混入はqPCRにより測定した（他社製品を100％として表示）。 2層分離の試薬に比べてNucleoZOLではDNAの混入はほとんど見られなかった。 |
| B | ： | フェノールの混入はA260/A230比より判定した。NucleoZOLはA260/A230の値が高く、フェノールのキャリーオーバーが少ないことが示された。 |
内容
NucleoZOL（製品コード 740404.200）
・NucleoZOL reagent 200 ml
NucleoSpin RNA Set for NucleoZOL（製品コード 740406.50）
・Binding Buffer MX
・Wash Buffer RA3 (concentrate)
・RNase-free H2O
・NucleoSpin RNA Columns
・Collection Tubes (2 ml)
・Collection Tubes (1.5 ml)
・NucleoZOL reagent 200 ml
NucleoSpin RNA Set for NucleoZOL（製品コード 740406.50）
・Binding Buffer MX
・Wash Buffer RA3 (concentrate)
・RNase-free H2O
・NucleoSpin RNA Columns
・Collection Tubes (2 ml)
・Collection Tubes (1.5 ml)
保存
室温
本製品以外に必要な試薬
• RNase-free 水
• 75％ エタノール
• 70％ イソプロパノール
• 100％ イソプロパノール
• 75％ エタノール
• 70％ イソプロパノール
• 100％ イソプロパノール
操作手順
用途
- 培養細胞、動物組織、植物組織、微生物からのRNA精製
- 精製RNAは、リアルタイムRT-PCR、ノザンブロッティング、プライマーエクステンション、アレイ解析、RNaseプロテクションアッセイなどに使用可能
NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。
Application
関連製品・受託
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