製品説明
NucleoSpin 96 DNA FFPEキットは、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE) 組織からハイスループットにDNA精製を行うためのキットである。Paraffin Dissolverの使用により、キシレンを使用しないでFFPEサンプルからパラフィンを除去できる。また、Paraffin Dissolverは青く着色されているため、目で見て確認しながら操作が行える。パラフィン除去後、Proteinase K処理とそれに引き続くDecrosslink Buffer D-Link中の脱クロスリンク反応によりDNAは効率的に遊離される。遊離されたDNAへカオトロピック塩とエタノールを加えることにより、効率よくDNAがNucleoSpin DNA FFPE Binding Strip/Plateのシリカ膜へ結合され、洗浄後、溶出バッファーで溶出することで純度の高いゲノムDNAを精製できる。
| | NucleoSpin 96 DNA FFPE |
| 原理 |
シリカメンブレン法 |
| 形状 |
96ウェルプレート |
| 操作 |
自動化装置または手動、吸引または遠心分離 |
| サンプル量 |
≦10 mg 組織、 ≦15 mg パラフィン |
| 精製サイズ |
50 bp~約5 kb |
| DNA回収量 |
サンプル量と品質に依存 |
| 溶出液量 |
100 μl |
| 精製時間 |
60分(溶解後) |
| 結合容量 |
20 μg |
図1.ヒトサンプルからのDNA精製
ヒトの回腸、及び胃の試料よりNucleoSpin 96 DNA FFPEを用いてDNAを精製した。各組織7つの試料を用いた。
回腸からは0.3 μg、胃からは1.7 μgのDNAが得られた。
内容
- Lysis Buffer FL
- Binding Buffer BQ1
- Wash Buffer BW
- Wash Buffer B5*
- Elution Buffer BE
- Proteinase Buffer PB
- Paraffin Dissolver(青色)
- Decrosslink Buffer D-Link
- Proteinase K(凍結乾燥品)
- NucleoSpin DNA FFPE Binding Plate
- MN Wash Plate
- Round-well Block
- MN Square-well Block
- Rack of Tube Strips
- Self adhering PE Foil
* 説明書に従って96~100%エタノールを添加後、使用
保存
室温
本製品以外に必要な試薬、機器(主なもの)
試薬
・96~100%エタノール
器具
NucleoSpin 96 DNA FFPE
・NucleoVac 96 Vacuum Manifold(製品コード 740681)
使用可能な他社の吸引マニフォールド
・Qiagen/QIAvac 96(MN Frame:製品コード 740680が必要)
・Promega/VacMan 96(NucleoSpin 96 Tissue Core Kitのみ対応可能)
操作手順
用途
- ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織からのDNA精製
- 新鮮、保存FFPEサンプルからのDNA精製
- スライド上標本(未染色、染色済)からのDNA精製
- 調製DNAはPCRなどに使用可能
NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。