Caspase Drug Screening Kits

システインプロテアーゼであるカスパーゼファミリー（caspase：cysteine-dependent aspartate-directed protease）はアポトーシスの進行における重要な因子であり、ミトコンドリア膜の破壊によるチトクロムcの放出、DNA損傷、ERストレス、TNF-αやFasLのような誘導物質など、様々な有害な生理学的刺激によって活性化される。カスパーゼは通常は不活性な前駆体として細胞内に存在している。アポトーシスがおこるとカスパーゼはプロテオリシスを受けて活性化され、細胞の生存に不可欠なタンパク質の分解へとつながるカスパーゼカスケードが開始される。

カスパーゼの阻害はアポトーシスを遅らせる。このことは薬剤スクリーニングにおいて有益な役割を持つ。PromoKineは、フローサイトメーターを用いてカスパーゼ阻害剤を効率的にスクリーニングするための各種Caspase Drug Screening Kitを用意している。検出には、それぞれのカスパーゼに特異的なコンセンサス切断配列を持ち、AFC (7‐アミノ‐トリフルオロメチルクマリン) で標識されたペプチドを基質として使用する。キットに含まれる活性型カスパーゼで合成基質を切断すると、マイクロタイタープレートリーダーで定量可能なフリーのAFCが放出される。スクリーニングしたい化合物を直接反応系に添加してカスパーゼ阻害レベルを測定することができる。操作はごく簡単で、マイクロタイタープレート中で直接行うことが可能である。それぞれのカスパーゼの測定条件は最適化されており、最大限の活性を得ることができる。

Caspase-1 Drug Screening Kit
Active Caspase-1 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate YVAD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD FMK (2 mM)

Caspase-2 Drug Screening Kit
Active Caspase-2 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate VDVAD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-3 Drug Screening Kit
Active Caspase-3 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate DEVD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase -3 Inhibitor (Z-VAD-FMK)

Caspase-4 Drug Screening Kit
Active Caspase-4 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate LEVD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-5 Drug Screening Kit
Active Caspase-5 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate WEHD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-6 Drug Screening Kit
Active Caspase-6 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate VEID-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-7 Drug Screening Kit
Active Caspase-7 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate DEVD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-8 Drug Screening Kit
Active Caspase-8 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate IETD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-9 Drug Screening Kit
Active Caspase-9 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate LEHD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

Caspase-10 Drug Screening Kit
Active Caspase-10 (lyophilized)
2x Reaction Buffer
Caspase Substrate AEVD-AFC (1 mM)
DTT (1 M)
Caspase Inhibitor, Z-VAD-FMK (2 mM)

－20℃
開封後のCell Lysis Buffer, 2X Reaction Buffer は4℃保存