制限酵素の高品質保証
制限酵素を使用するうえで重要な純度検定であるLigation-Recutting TestにおけるLigation-Recutting効率品質規格を一覧表にまとめた。TaKaRaの制限酵素は、この規格により高い品質を保証している。
Ligation-Recutting Test対象の基質DNAに対して、まず、2～50倍過剰の酵素を作用させる。
切断されたDNAを回収し、5'末端濃度が0.1～1.0 μMになるようにT4 DNA Ligase Buffer［66 mM Tris-HCl（pH7.6）、6.6 mM MgCl2、10 mM DTT、0.4 mM ATP］に溶解させる。適当量のT4 DNA Ligaseを加え、16℃で1時間あるいは16～18時間反応させる。DNA回収後、制限酵素反応液に溶解させ、同じ制限酵素でDNAを再切断する。以上の結果により、ligase inhibitor、phosphatase、exonucleaseの有無を判定している。
| 制限酵素 | ライゲー ション 効率(％) |
再切断 効率 (％) |
| Aat II | >90 | >95 |
| Acc I | >90 | 100 |
| Acc II | >90 | 100 |
| Acc III | >95 | 100 |
| Afa I | 90 | 100 |
| Afl II | >95 | 100 |
| Alu I | >95 | 100 |
| Aor13H I | >95 | 100 |
| Aor51H I | 90 | 95 |
| Apa I | >95 | 100 |
| ApaL I | >95 | 100 |
| Bal I | >90 | 100 |
| BamH I | >95 | 100 |
| Ban II | 100 | 100 |
| Bci T130 I | 90 | 90 |
| Bcn I ＊ | 90 | 90 |
| Bgl I | >95 | 100 |
| Bgl II | >95 | 100 |
| Bln I | 90 | 100 |
| BmeT110 I | >90 | 100 |
| BmgT120 I | 90 | 100 |
| Bpu1102 I | 90 | 100 |
| BspT104 I | >95 | 100 |
| BspT107 I | >95 | 100 |
| Bsp1286 I | 90 | 100 |
| 制限酵素 | ライゲー ション 効率(％) |
再切断 効率 (％) |
| Bsp1407 I | 90 | 100 |
| BssH II | 90 | 100 |
| BstP I | >95 | 100 |
| BstX I | >90 | 100 |
| Bst1107 I | 90 | 90 |
| Cfr10 I | 90 | 100 |
| Cla I | >95 | 100 |
| Cpo I | 100 | 100 |
| Dde I | >95 | >95 |
| Dra I | >90 | 100 |
| Dpn I | >70 | >90 |
| Eae I | 100 | 100 |
| Eam1105 I | 90 | 90 |
| EcoO65 I | 95 | 100 |
| EcoO109 I | >95 | 100 |
| EcoR I | 100 | 100 |
| EcoR V | 90 | 100 |
| EcoT14 I | 100 | 100 |
| EcoT22 I | 90 | 100 |
| Eco52 I | 90 | 100 |
| Eco81 I ＊ | 90 | 90 |
| Fba I | 100 | 100 |
| Fok I | >95 | 100 |
| Hae II | >95 | 100 |
| Hae III | >95 | 100 |
| 制限酵素 | ライゲー ション 効率(％) |
再切断 効率 (％) |
| Hap II | >90 | 100 |
| Hha I | >90 | 100 |
| Hinc II | >95 | 100 |
| Hind III | 100 | 100 |
| Hinf I | >90 | 100 |
| Hin1 I | 90 | 100 |
| Hpa I | >95 | 100 |
| Kpn I | >90 | >95 |
| Mbo I | 95 | 100 |
| Mbo II | 90 | 100 |
| Mfl I | >95 | >95 |
| Mlu I | 100 | 100 |
| Msp I | 90 | 100 |
| Mun I | 90 | 100 |
| Nae I | 90 | >95 |
| Nco I | >95 | 100 |
| Nde I | 90 | 100 |
| Nhe I | 90 | 95 |
| Not I | >95 | 100 |
| Nru I | 95 | 95 |
| Nsb I | >90 | >90 |
| PmaCI | 95 | 100 |
| PshA I | >90 | 100 |
| PshB I | 95 | 100 |
| Psp1406 I | 90 | 100 |
| 制限酵素 | ライゲー ション 効率(％) |
再切断 効率 (％) |
| Pst I | >95 | 100 |
| Pvu I | >95 | 100 |
| Pvu II | >95 | 100 |
| RspRS II | >95 | >95 |
| Sac I | >99 | 100 |
| Sac II | >90 | 95 |
| Sal I | >95 | 100 |
| Sau3A I | >95 | 100 |
| Sca I | >95 | 100 |
| Sfi I | 90 | 100 |
| Sma I | >95 | 100 |
| Smi I | >80 | >90 |
| SnaB I | 90 | >95 |
| Spe I | >99 | 100 |
| Sph I | 100 | 100 |
| Sse8387 I | 100 | 100 |
| Ssp I | 90 | 100 |
| Stu I | >95 | 100 |
| Taq I | >90 | >90 |
| Tth111 I | >90 | >90 |
| Van91 I | 90 | 100 |
| VpaK11B I | >90 | 100 |
| Xba I | 100 | 100 |
| Xho I | >95 | 100 |
| Xsp I | >90 | 100 |
* ライゲーション反応にはTaKaRa DNA Ligation Kit Ver.2を使用し、26℃で10分間反応させる。
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
