E. coli JM109 Competent Cells

MandelとHigaによる大腸菌における形質転換法の確立は、組換えDNA実験の重要な基礎となった。大腸菌をCaイオン存在下に置くと外来DNA（プラスミド、ファージDNA）を細胞内に取り込む“コンピテント”状態になり、この状態の細胞をコンピテントセルと称している。
組換えDNA実験では、コンピテントセルを用いた形質転換、形質導入等がよく行われるが、効率が高く再現性のよいコンピテントセルの作製は難しいとされている。遺伝子ライブラリーの作製、組換え体プラスミドの作製やサブクローニング等、特に目的とする遺伝子の含量が少ない場合では導入効率の高いコンピテントセルを用いることが重要となる。
タカラバイオでは、Hanahanの方法を改良した新しい方法により、効率の高い8種類のCompetent Cells E. coli HST08 Premium、HST02、HST04 dam^－/dcm^－、JM109、DH5α、HB101、CJ236、MV1184（これらは全てEK1系の宿主大腸菌である）を調製している。

α-相補性選択宿主E. coli JM109
E. coli JM109は、pUC系プラスミドベクターDNAによる形質転換やM13ファージベクターDNAによる形質導入等を行う際に、ベクターDNAより生成するlacZαペプチドとJM109F'にコードされるlacZΔM15とによるβ-ガラクトシダーゼの活性回復（α-相補性）を利用することにより、組換え体の選別を容易にする菌株である。
F'プラスミドを有するため、遺伝子ライブラリーの作製やサブクローニングの他に、M13ベクターDNAの宿主として一本鎖DNAの調製にも利用できる。

E. coli JM109 Competent Cells	100 μl×10本
pBR322 DNA (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium*	1 ml×10本

【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

－80℃

recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17(r_K^- m_K⁺), e14^- (mcrA^-), supE44, relA1, Δ (lac-proAB)/F'〔traD36, proAB⁺, lac I^q, lacZΔM15〕

1～2×10⁹ bacteria/ml

1）形質転換効率
1 ngのプラスミドDNAで形質転換した場合
100μl E. coli JM109 Competent Cells/1 ng pBR322 plasmid
　　　＞1×10⁸ transformants/1 μg pBR322 plasmid DNA
2）F'プラスミドの安定性
pUC19DNAを用いて形質転換を行い、100 μg/mlのアンピシリン、0.3 mM IPTG、60 μg/ml X-Galを含むLB-寒天培地にプレートした場合、白色のコロニーの出現率は1％以下である。