反応用バッファー添付
製品説明
Recombinant DNase I（RNase-free）はウシ膵臓由来のDNase I遺伝子を発現・精製した組換えタンパク質で、一本鎖および二本鎖のDNAを同程度にランダムに分解し、5’-P末端を持つオリゴヌクレオチドを生成させる、endodeoxyribonucleaseである。Mg2+存在下では二本鎖DNAにランダムにニックを入れるが、Mn2+存在下では二本鎖の同時切断が起こり、DNAを断片化する。
本酵素は、実用上問題とならないレベルまでProteaseおよびRNaseを除いているため、中性域での安定性が向上しており、RNAの調製の際に安全に用いることができる。
本酵素は、実用上問題とならないレベルまでProteaseおよびRNaseを除いているため、中性域での安定性が向上しており、RNAの調製の際に安全に用いることができる。
保存
－20℃
濃度
5 U/μl
形状
| 20 mM | Tris-HCl, pH7.5（at 4℃） |
| 50 mM | NaCl |
| 0.1 mM | CaCl2 |
| 50％ | Glycerol |
起源
Expressed in non-animal host carrying plasmid encodes the gene of bovine pancreas DNase I.
添付Buffer組成（保存：－20℃）
（10×DNase I Buffer）
| 400 mM | Tris-HCl, pH7.5 |
| 80 mM | MgCl2 |
| 50 mM | DTT |
活性の定義
仔牛胸腺DNAを基質として、25℃、pH5.0において反応液の260 nmの吸光度を1分間に0.001増加させる酵素活性を1 Uとする（Kunitz unit1））
活性測定用反応液組成
| 100 mM | 酢酸ナトリウム, pH5.0（25℃） |
| 5 mM | MgSO4 |
| 40 μg/ml | 基質DNA |
品質管理データ
性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。
用途
- T7あるいはSP6 RNA Polymeraseを用いてin vitro transcriptionによるRNA合成を行った後、buffer置換せずに鋳型DNAを消化5）に用いられる。
- DNA Polymerase I（製品コード 2130）と共にnick translation2）に用いられる。
- Mn2+存在下でshot-gun sequencingのためのDNAライブラリー作成3）に用いられる。
- DNA-タンパク質の相互作用を調べるフットプリント法4）に用いられる。
- RT-PCR前のゲノムDNAの除去に用いられる。
一般的性質
- 分子量
約39,000 - 至適pH
pH7.0～8.0（2価のカチオン存在下で活性は最大） - 阻害剤
EDTA - 安定性
75℃、10分の熱処理で不可逆的に失活する。
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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