- 最も高い誘導倍率を実現するTet-On 3Gシステム
- 哺乳類細胞での厳密な遺伝子発現誘導実験が可能
- サイレンシングが起こりにくいEF1αプロモーター搭載タイプ
製品説明
Tet-On 3G Inducible Expression System（EF1alpha）は、調節因子(Tet-On 3G)発現プロモーターにヒトポリペプチド鎖伸長因子遺伝子（EEF1A1）プロモーター（EF1αプロモーター）の利用により、従来タイプのCMVプロモーターがサイレント化される造血細胞や幹細胞などにおいてもTet-On 3G調節因子を長期間安定的に細胞内で発現させることができる。また、各システムの応答ベクターは、バックグラウンド発現が最も低いTet-On3Gシステムと同じpTRE3Gベクターなどで構成されており、Tetシリーズ中で最も高い誘導倍率を実現することができる。
EF1αプロモーター
Jurkat細胞は、CMVプロモーターベクターでは発現量の低下やクローンごとの発現量の変動が起きやすいことが知られている。Jurkat細胞にEF1αプロモータータイプのTet-On 3Gシステムを用いると、全体の83％のクローンが高レベルの誘導発現を示し、33％のクローンが2,000倍を超える非常に高い誘導倍率を示した。このようにTetシステムを構築する細胞の種類に合わせて、プロモーターのタイプを選択することが重要である。
表1. Tet-On 3G System (EF1alpha Promoter)のベクター概略
| Tet-On 3G Inducible Expression Systems with EF1 alpha Regulator Vectors | ||
|---|---|---|
| 製品名 | Tet-On調節ベクター | TRE応答発現ベクター |
| Tet-On 3G Inducible Expression System (EF1alpha Version)（製品コード 631167） |  |
 |
| Tet-On 3G Bidirectional
Inducible Expression System (EF1alpha Version) （製品コード 631340） |
||
| Tet-On 3G Bidirectional
Inducible Expression System (EF1alpha, mCherry) （製品コード 631341） |
||
| Tet-On 3G Bidirectional
Inducible Expression System (EF1alpha, ZsGreen1) （製品コード 631342） |
||
| Tet-On 3G Inducible Expression System (EF1alpha, ZsGreen1)（製品コード 631348） | ||
内容
・Tet-On調節ベクター（pEF1α-Tet3G）
・TRE応答発現ベクター（PTRE3Gプロモーター）
・Control vector (pTRE3G-Luc)
・Hygromycin linear selection marker
・Puromycin linear selection marker
・Tet Approved FBS (50 ml)
・Xfect Transfection Reagent（100反応分）
注意）
本製品に含まれるTRE応答発現ベクターは、プラスミド調製した際の収量が、一般的なプラスミドよりかなり低くなります。収量を上げるために、培養液量を増やして調製していただくことをお勧めします。
市販のプラスミド調製用キットをご使用の場合は、低コピープラスミド用のプロトコールに従って調製してください。
・TRE応答発現ベクター（PTRE3Gプロモーター）
・Control vector (pTRE3G-Luc)
・Hygromycin linear selection marker
・Puromycin linear selection marker
・Tet Approved FBS (50 ml)
・Xfect Transfection Reagent（100反応分）
注意）
本製品に含まれるTRE応答発現ベクターは、プラスミド調製した際の収量が、一般的なプラスミドよりかなり低くなります。収量を上げるために、培養液量を増やして調製していただくことをお勧めします。
市販のプラスミド調製用キットをご使用の場合は、低コピープラスミド用のプロトコールに従って調製してください。
保存
－20℃
用途
哺乳類細胞での目的遺伝子の発現誘導
毒性遺伝子の発現制御
CMVプロモーターがサイレント化される胚性幹細胞などの発現誘導実験
毒性遺伝子の発現制御
CMVプロモーターがサイレント化される胚性幹細胞などの発現誘導実験
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