CycleavePCR™ GBS Capsular Typing Kit

B群溶血性連鎖球菌（Streptococcus agalactiae；GBS）は、グラム陽性細菌で、ヒトの生殖器および腸管の常在菌であるが、出生直後の新生児における敗血症や生後3ヵ月までに見られる髄膜炎、あるいは高齢者の侵襲性感染症等の主な原因菌となっている。培養によるGBS検査では、結果を得るまでに時間がかかること、検出感度が低いことが問題となっている。菌体表層に存在する莢膜が感染の成立に重要な役割を果たし、現在GBSの莢膜型は10種類が報告されている。特に新生児の重篤な髄膜炎や敗血症は、莢膜型Ia型、Ib型、III型が関与することが報告されており、それらの型をタイピングすることが重要になる。
本製品は、CycleavePCR Streptococcus agalactiae (GBS) Detection Kit（製品コード CY233）を用いた検出でGBSが陽性であったサンプルについて、莢膜型をコードするCPS遺伝子をターゲットとして莢膜型Ia型、Ib型、III型をタイピングするキットである。
検出にはサイクリングプローブ法を採用し、cps（Ia）遺伝子ならびにcps（III）遺伝子を検出するためのFAM標識プローブ、cps（Ib)遺伝子検出用のROX標識プローブが含まれている。二波長を同時にモニタリングすることで、cps（Ia）遺伝子とcps（Ib）遺伝子ならびにcps（III）遺伝子の3遺伝子を、2本のチューブでタイピングすることが可能である。リアルタイム検出なので、電気泳動が不要であり、迅速に結果が得られる。

本製品は、慶應義塾大学医学部感染症学教室 生方公子先生監修の元、リアルタイムPCRを用いてタイピングするためのキットとして開発されました。

（50反応分：cps (Ia) ＆ cps (Ib)、cps (III) 各25反応分×25 μl反応系）

●	1．	2×CycleavePCR Reaction Mixture	625 μl
●	2．	cps (Ia) ＆ cps (Ib) Primer/Probe Mix (FAM, ROX)	50 μl	＊1
	3．	cps (III) Primer/Probe Mix (FAM)	50 μl	＊1
○	4．	dH2O	500 μl
●	5．	cps (Ia) Positive Control	30 μl	（15反応分）＊2
●	6．	cps (Ib) Positive Control	30 μl	（15反応分）＊2
●	7．	cps (III) Positive Control	30 μl	（15反応分）＊2

＊1	蛍光標識プローブを含んでいますので、遮光に留意してください。
＊2	開封後は、Positive Controlの汚染を避けるため、コンポーネント1～4と、コンポーネント5～7を別々の箱に入れ、それぞれ－20℃で保存してください。

＜検出反応に必要なもの＞

• リアルタイムPCR装置および専用チューブ
  Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
  Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760）
  Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
• 卓上遠心器
• 200 μl，20 μl，10 μl　各マイクロピペット
• マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）

－20℃

Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
取扱説明書とあわせて使用する。
定性解析（＋／－判定）用（PDF、946 K）

遺伝子検出・検査　関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「遺伝子検査（食品・水質・家畜他）」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。