NucleoSpin^® 8/96 DNA FFPE

NucleoSpin 8/96 DNA FFPEキットは、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE) 組織からハイスループットにDNA精製を行うためのキットである。Paraffin Dissolverの使用により、キシレンを使用しないでFFPEサンプルからパラフィンを除去できる。また、Paraffin Dissolverは青く着色されているため、目で見て確認しながら操作が行える。パラフィン除去後、Proteinase K処理とそれに引き続くDecrosslink Buffer D-Link中の脱クロスリンク反応によりDNAは効率的に遊離される。遊離されたDNAへカオトロピック塩とエタノールを加えることにより、効率よくDNAがNucleoSpin DNA FFPE Binding Strip/Plateのシリカ膜へ結合され、洗浄後、溶出バッファーで溶出することで純度の高いゲノムDNAを精製できる。

	NucleoSpin 8 DNA FFPE	NucleoSpin 96 DNA FFPE
原理	シリカメンブレン法
形状	8ウェルストリップ	96ウェルプレート
操作	自動化装置または手動、吸引または遠心分離
サンプル量	≦10 mg 組織、 ≦15 mg パラフィン
精製サイズ	50 bp～約5 kb
DNA回収量	サンプル量と品質に依存
溶出液量	100 μl
精製時間	60分（溶解後）
結合容量	20 μg

図1．ヒトサンプルからのDNA精製
ヒトの回腸、及び胃の試料よりNucleoSpin 96 DNA FFPEを用いてDNAを精製した。各組織7つの試料を用いた。
回腸からは0.3 μg、胃からは1.7 μgのDNAが得られた。

・Lysis Buffer FL
・Binding Buffer BQ1
・Wash Buffer BW
・Wash Buffer B5^＊
・Elution Buffer BE
・Proteinase Buffer PB
・Paraffin Dissolver（青色）
・Decrosslink Buffer D-Link
・Proteinase K（凍結乾燥品）
・NucleoSpin DNA FFPE Binding Plate（NucleoSpin 96 DNA FFPEのみ）
・NucleoSpin DNA FFPE Binding Strip（NucleoSpin 8 DNA FFPEのみ）
・MN Wash Plate
・Round-well Block（NucleoSpin 96 DNA FFPEのみ）
・MN Square-well Block（NucleoSpin 96 DNA FFPEのみ）
・Rack of Tube Strips
・Self adhering PE Foil（NucleoSpin 96 DNA FFPEのみ）
* 説明書に従って96～100％エタノールを添加後、使用

室温

試薬
・96～100％エタノール

器具
NucleoSpin 8 DNA FFPE
・NucleoVac 96 Vacuum Manifold（製品コード 740681）
・Starter Set C（製品コード 740684）：遠心精製法の場合
・Starter Set A（製品コード 740682）：吸引精製法の場合

　　使用可能な他社の吸引マニフォールド
　　・Qiagen/QIAvac 96（MN Frame：製品コード 740680が必要）

NucleoSpin 96 DNA FFPE
・NucleoVac 96 Vacuum Manifold（製品コード 740681）

　　使用可能な他社の吸引マニフォールド
　　・Qiagen/QIAvac 96（MN Frame：製品コード 740680が必要）
　　・Promega/VacMan 96（NucleoSpin 96 Tissue Core Kitのみ対応可能）

NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。