NucleoSpin^® DNA Forensic

NucleoSpin DNA Forensicは、各種の法医学サンプルからゲノムDNAを精製するためのキットであり、口腔粘膜、少量組織や細胞、血液痕やタバコ吸殻などのサンプルからの高純度ゲノムDNA精製に適している。
このキットはISO18385に準拠しており、ヒトゲノムDNAの混入のリスクが極限まで抑えられている。
本製品は、カオトロピック塩条件下で核酸をシリカメンブレンに結合させ、エタノールを含むWash Bufferで洗浄して夾雑物を除去し、Elution Bufferを用いてDNAを溶出する。
新たに開発された溶解バッファーの使用により、血痕、組織付着サンプル、スワブサンプルなど様々な法医学サンプルからDNAを高収率で回収することが可能である。また、このキットは微量の試料からも効率よくDNAを回収できるため、DNA含量が多いサンプルから非常に少ないサンプルまで、幅広い対象サンプルから安定的にDNAを抽出できる。本製品で精製したDNAはShort Tandem Repeat（STR）解析を阻害する成分が完全に除去されており、多くの法医学サンプルから信頼性の高いSTRプロファイルを得ることができる。 さらに、ハイスループット精製に適した、磁性ビーズ利用のNucleoMag DNA Forensicキットと同一のバッファー系を使用しているため、容易にハイスループット化可能な磁性ビーズを使用した精製系へ移行することが可能である。 NucleoSpin Forensic Filtersは、サンプル溶解後、付着していた担体（口腔粘膜サンプルの綿棒等）と溶解液を、効率よく分離するために使用できる。

原理	シリカメンブレン法
形状	ミニスピンカラム
サンプル	ケースワークサンプル （血液痕、タバコ吸殻、スワブサンプルなど）
DNA回収量	1～3 μg（口腔粘膜から精製する場合）
回収濃度	10～30 ng/μl（口腔粘膜から精製する場合）
溶出液量	50～100 μl
結合容量	7 μg

図1. さまざまな法医学サンプルからのDNA精製
NucleoMag DNA Forensic と NucleoSpin DNA Forensicを用いてさまざまなサンプルからゲノムDNAを精製した。すべてのサンプルからqPCRで解析可能な量のDNAが回収できた。また、NucleoSpinとNucleoMagの両キットでほぼ同等の回収量が得られており、両キットで相互の移行が容易であることが示された。
図2. ゲノムDNAの回収率
綿棒などの拭き取り物に10μlから0.01μlの液量の血液を塗布した後、NucleoSpin DNA Forensicを用いてDNA抽出した。精製DNAはqPCR法によりその回収量を測定した。回収DNA総量（青棒）と1 μlあたりの回収量（オレンジ線）を図に示した。使用した血液量に応じたDNA回収量が得られており、ロスのないDNA精製ができることがわかった。

・ NucleoSpin DNA Forensic Columns
・ Collection Tubes (2 ml)
・ Lysis Buffer FOL
・ Binding Buffer FOB
・ Wash Buffer FOW1
・ Wash Buffer FOW2
・ Elution Buffer FOE
・ Liquid Proteinase K
・ Reducing Agent TCEP

室温

試薬

• 96～100％エタノール

器具

• 1.5 mlマイクロ遠心チューブ
• 微量高速遠心機
• ボルテックスミキサー
• サンプル破砕用ホモジナイザー