大腸菌からのHisタグ融合タンパク質の抽出に
- Hisタグ融合タンパク質精製に最適な調製済みの抽出バッファー
- 細菌、酵母、哺乳細胞、バキュロウイルスに感染した細胞からタンパク質を抽出
- 簡単・迅速な手順で、わずか10分のインキュベーションで抽出完了
- 穏やかな非変性抽出により生物活性を維持
- His、GST、FLAG-HAなどのタグや様々なタンパク質抽出に使用可能
- 超音波処理よりも効率的に抽出
製品説明
xTractor Bufferは、細菌、酵母、哺乳細胞、バキュロウイルスに感染した細胞からタンパク質を抽出するための、効率的な細胞溶解バッファーである。本製品は穏やかな非変性条件で、迅速（10分）かつ効率的に細胞等を溶解する。Hisタグ融合タンパク質の抽出に最適化されているため、すべての固定化金属アフィニティークロマトグラフィー（IMAC）レジンと互換性がある。
抽出法は簡単である。細胞ペレットをバッファーに再懸濁し（1：20 w/v）、10分間穏やかに混合するだけである（図1）。インキュベーション後には細胞断片や沈殿物が認められないライセートが得られる。抽出後はライセートを遠心または濾過するだけで、アフィニティーレジンカラムにアプライして目的のHisタグ融合タンパク質を分離できる。遠心や濾過を行わず、得られたライセートをTALON CellThru Columnに直接アプライすることで実験時間を短縮することも可能である（図1 パネルB）。
図1. xTractor Bufferによる簡便なHisタグ融合タンパク質の抽出
パネルA：抽出後は、遠心または濾過を行い標準的なTALON Resin Columnでの精製に使用
パネルB：抽出後そのままTALON CellThruにアプライして目的タンパク質を精製
この抽出法は大腸菌細胞からタンパク質を抽出する極めて効率的な方法であり、高純度で高収量のタンパク質が得られる。超音波法と比較して、xTractor Buffer抽出法では同量のサンプルからより多くのタンパク質を得ることができる。さらに、得られたタンパク質は、超音波法で得られたタンパク質より高い生理活性を示す。本法はβ-ガラクトシダーゼ（LacZ）など、膜を完全に破壊しないと抽出できない高分子量タンパク質に対して特に効果を発揮する。
xTractor Buffer Kitには、大腸菌ペレット10 gまたはHT 96-Well Plate全体からの小規模抽出に十分量の200 mlのxTractor Bufferと、リゾチームおよびDNase Iが含まれている。
抽出法は簡単である。細胞ペレットをバッファーに再懸濁し（1：20 w/v）、10分間穏やかに混合するだけである（図1）。インキュベーション後には細胞断片や沈殿物が認められないライセートが得られる。抽出後はライセートを遠心または濾過するだけで、アフィニティーレジンカラムにアプライして目的のHisタグ融合タンパク質を分離できる。遠心や濾過を行わず、得られたライセートをTALON CellThru Columnに直接アプライすることで実験時間を短縮することも可能である（図1 パネルB）。
図1. xTractor Bufferによる簡便なHisタグ融合タンパク質の抽出
パネルA：抽出後は、遠心または濾過を行い標準的なTALON Resin Columnでの精製に使用
パネルB：抽出後そのままTALON CellThruにアプライして目的タンパク質を精製
この抽出法は大腸菌細胞からタンパク質を抽出する極めて効率的な方法であり、高純度で高収量のタンパク質が得られる。超音波法と比較して、xTractor Buffer抽出法では同量のサンプルからより多くのタンパク質を得ることができる。さらに、得られたタンパク質は、超音波法で得られたタンパク質より高い生理活性を示す。本法はβ-ガラクトシダーゼ（LacZ）など、膜を完全に破壊しないと抽出できない高分子量タンパク質に対して特に効果を発揮する。
xTractor Buffer Kitには、大腸菌ペレット10 gまたはHT 96-Well Plate全体からの小規模抽出に十分量の200 mlのxTractor Bufferと、リゾチームおよびDNase Iが含まれている。
内容
xTractor Buffer Kit
（製品コード 635623）
・xTractor Buffer（200 ml）
・100× Lysozyme
・DNase I
（製品コード 635623）
・xTractor Buffer（200 ml）
・100× Lysozyme
・DNase I
保存
DNase I：－20℃
その他のコンポーネント：4℃
その他のコンポーネント：4℃
Application
BIO VIEW / Clontechniques
Q&A： Clontech社TALON® レジン特集
ヒスチジンタグ融合タンパク質精製の切り札
TALON® Resin
Ni-NTA IMACで混入することが多い大腸菌由来のSlyDを結合しないTALON® Resin
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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